Effect of chelators from the class of 8-hydroxyquinolines on magnesium-containing bacterial alkaline phosphatase

Abstract

4 Abstrakt Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Student: Mohammadhossein Karami Školitel: PharmDr. Marcel Hrubša, Ph.D. Název diplomové práce: Účinek chelátorů ze skupiny 8-hydrochinolinů na hořčík obsahující bakteriální alkalickou fosfatásu Hořčík je esenciálním kofaktorem mnoha enzymů, avšak většina nízkomolekulárních chelátorů postrádá selektivitu vůči kovům, což může narušovat katalytické reakce potřebující hořčík jako kofaktor. Tato práce zkoumá, jak deriváty 8-hydroxychinolinu ovlivňují aktivitu alkalické fosfatázy z Escherichia coli, enzymu obsahujícího ve svém aktivním místě zinek a hořčík. Enzymová aktivita byla měřena pomocí kinetického spektrofotometrického testu v 96ti jamkové destičce s p-nitrofenylfosfátem v alkalickém tris pufru (pH 10, 37 řC). Rychlost této enzymatické reakce byla analyzována po dobu čtyř minut. Vždy byla korigována o slepý vzorek a vyjádřena jako procento inhibice negativní kontroly. Z křivek koncentrace-účinek byly stanoveny hodnot IC₅₀, přičemž kyselina diethylentriaminpentaoctová (DTPA) sloužila jako referenční chelátor, tj. pozitivní kontrola. Všechny testované deriváty inhibovaly enzym v závislosti na koncentraci, avšak s rozdílnou účinností. Nejsilnějšími inhibitory byly 8- hydroxychinolin, kloxychin a...