Vplyv vybraných silybínov na eflux ivermektínu P-glykoproteinom vlasovky slezovej

Abstract

Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biochemical Sciences Candidate: Denisa Husárová Supervisor: doc. Ing. Petra Matoušková, PhD. Title of Diploma Thesis: The impact of selected silybins on the efflux of ivermectin by P- glycoprotein from Haemonchus contortus P-glycoprotein (P-gp) is an ATP-driven transmembrane transporter. It can efflux a broad variety of structurally diverse and functionally unrelated hydrophobic compounds. Over- expression of P-gp is often associated with multidrug resistance. This has been a major obstacle in stopping effective therapy for parasitic diseases.1 P-gp is probably responsible for the drug resistance of ivermectin, a drug used in human and veterinary medicine to treat parasitic diseases caused by Nematoda. This study aims to use silybins, which can potentially cause an inhibition of P-gp, in other words, could promote an intracellular effect of ivermectin. During this study, we have been using 2 types of cells, with (transfected) and without the expression of P-gp. Both types of cells were foremostly used for verification of IC50 of ivermectin and doxorubicin. In the next step, the effects of individual silybin extracts on the cell line were evaluated as part of the preparation for the final plan, which in the future would involve...

Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Denisa Husárová Školitel: doc. Ing. Petra Matoušková, PhD. Název diplomové práce: Vplyv vybraných silybínov na eflux ivermektínu P-glykoproteínom vlasovky slezové P-glykoproteín (P-gp) je transmembránový transportér poháňaný ATP. Dokáže vylučovať široké spektrum štrukturálne rôznorodých a funkčne nesúvisiacich hydrofóbnych zlúčenín. Nadmerná expresia P-gp je často spojená s mnohopočetnou liekovou rezistenciou, čo predstavuje veľkú prekážku pri dosahovaní účinnej liečby parazitárnych ochorení. P-gp je pravdepodobne zodpovedný za rezistenciu na ivermektín - liek používaný v humánnej aj veterinárnej medicíne na liečbu parazitárnych chorôb spôsobených hlístami (Nematoda). Cieľom tejto štúdie je použiť silybíny, ktoré by mohli inhibovať účinok P-gp, a teda podporiť intracelulárny účinok ivermektínu. Počas tejto štúdie sme používali dva typy buniek LLC PK1- s heterológnou expresiou P-gp z vlasovky slezové (transfekované) a bez expresie P-gp. Obe línie buniek boli primárne použité na určenie IC₅₀ pre ivermektín a doxorubicín. V ďalšom kroku bolo zisťované pôsobenie jednotlivých extraktov silybínov na bunečnú líniu v rámci prípravy na finálny plán, ktorý by bol v budúcnosti aplikovať silybíny s cieľom zvýšiť...