Zavedení metod na stanovení markerů oxidačního stresu v plazmě a erytrocytech

Abstract

Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biochemical Sciences Candidate: Eliška Mouková Supervisor: doc. PharmDr. Iva Boušová, Ph.D. Consultant: Mgr. Martin Horní Title of Diploma Thesis: Introduction of methods for determining oxidative stress markers in plasma and erythrocytes Oxidative stress is described as an imbalance between the production of reactive oxygen and nitrogen species (RONS) and the antioxidant defense system in favor of RONS production. This imbalance can lead to the oxidation of lipids, proteins, and DNA, resulting in tissue damage and cell death. Oxidative stress contributes to a number of pathological conditions, such as cancer, neurodegenerative diseases, cardiovascular diseases, and diabetes mellitus. In this thesis, we focused on optimizing the assessment of antioxidants, specifically superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), glutathione reductase (GR), reduced glutathione (GSH), glutathione-S-transferase (GST), glutathione peroxidase (GPx), and SH-groups. All assessments were performed using spectrophotometric methods based on measuring absorbance or its change over time. The GST and GPx activity assessments did not require further adjustments, and the methods were immediately applicable. The SOD, CAT, and GR activity and SH group...

Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Eliška Mouková Školitel: doc. PharmDr. Iva Boušová, Ph.D. Konzultant: Mgr. Martin Horní Název diplomové práce: Zavedení metod na stanovení markerů oxidačního stresu v plazmě a erytrocytech Oxidační stres je popisován jako nerovnováha mezi produkcí reaktivních forem kyslíku a dusíku (RONS) a antioxidačním obranným systémem ve prospěch produkce RONS. Tato nerovnováha může vést k oxidaci lipidů, bílkovin a DNA, což má za následek poškození tkání a smrt buněk. Oxidační stres se podílí na řadě patologických stavů, jako jsou nádorová onemocnění, neurodegenerativní onemocnění, kardiovaskulární choroby nebo diabetes mellitus. V této diplomové práci jsme se zabývali optimalizací stanovení antioxidantů, konkrétně superoxiddismutasy (SOD), katalasy (CAT), glutathionreduktasy (GR), redukovaného glutathionu (GSH), glutathion-S-transferasy (GST), glutathionperoxidasy (GPx) a SH-skupin. Všechna stanovení byla prováděna pomocí spektrofotometrických metod, jejichž principem bylo měření absorbance nebo její změny za čas. Stanovení aktivity GST a GPx nevyžadovala další úpravy a metody byly použitelné rovnou. Stanovení aktivit SOD, CAT a GR a koncentrace SH-skupin musela být optimalizována a v tuto chvíli se dají použít pro...