Stanovení vlivu vývojových látek na hladinu glukózy v buněčných modelech

Abstract

Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Pharmacology and Toxicology Student: Michaela Kalicovová Supervisor: PharmDr. Lucie Smutná, PhD. Title of diploma thesis: Evaluation of developmental substances effect on glycaemia in cellular models Metabolic diseases, led by diabetes mellitus, currently represent one of the most significant challenges in modern medicine. A deeper understanding of the molecular mechanisms involved in the regulation of glucose homeostasis is crucial for the development of new therapeutic agents. The nuclear receptor PXR (pregnane X receptor) plays an important role in glucose metabolism, providing a comprehensive network of regulatory mechanisms. The aim of this study was to determine the effect of the developmental compound MI891, which exhibits antagonistic activity towards PXR, on the interference with glucose homeostasis. In the experimental part of the study, the influence of MI891 on the expression of genes involved in the regulation of glucose levels (SLC2A2, G6PC, and PCK1) and the main target gene PXR, CYP3A4, was assessed in differentiated HepaRG cells. The gene expression was measured using the qRT-PCR method. Subsequently, the study was focused on the evaluation of the MI891 effect on the glucose content in the lysate of HepaRG cells...

Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Michaela Kalicovová Školitelka: PharmDr. Lucie Smutná, Ph.D. Název diplomové práce: Stanovení vlivu vývojových látek na hladinu glukózy v buněčných modelech Metabolická onemocnění, v čele s onemocněním diabetes mellitus, představují v současnosti jednu z nejzávažnějších výzev moderní medicíny. Hlubší porozumění molekulárním mechanismům, které ovlivňují regulaci glukózové homeostázy je klíčové právě pro vývoj nových látek. Důležitou roli v metabolismu glukózy hraje nukleární receptor PXR (pregnanový X receptor), který řídí komplexní síť regulačních mechanismů. Cílem této práce bylo stanovit vliv vývojové látky MI891, která vykazuje antagonistické působení na PXR, na zásah do homeostázy glukózy. V experimentální části práce byl stanovený vliv MI891 na expresi genů zahrnutých v regulaci hladiny glukózy (SLC2A2, G6PC, PCK1) a hlavního cílového genu PXR, CYP3A4, v diferencovaných buňkách HepaRG. Ke stanovení genové exprese byla použita metoda qRT-PCR. Následně bylo cílem stanovit vliv látky MI891 na množství glukózy v lyzátu HepaRG buněk a současně i v jejich kultivačním médiu. Měření hladiny glukózy v lyzátu a médiu bylo zajištěno pomocí komerčně dostupného kitu pro fluorometrické stanovení hladiny...