Vývoj metódy na UHPSFC-PDA-MS analýzu ginsenosidov v potravinových doplnkoch

Abstract

Department: Department of analytical chemistry Candidate: Tatiana Vaľková Supervisor: Prof. PharmDr. Lucie Nováková Ph.D. Title of the diploma thesis: Method development for UHPSFC-PDA-MS analysis of ginsenosides in dietary supplements The aim of this diploma thesis was to develop an analytical method for the analysis of ginsenosides, the main active compounds of Panax ginseng, in dietary supplements. Measurements were carried out with ultra-high performance supercritical fluid chromatography (UHPSFC) system Acquity UPC2 coupled with photodiode array (PDA) and mass spectrometry (MS) detection. The first step was the column screening using 11 stationary phases in combination with a CO2-based mobile phase and 4 organic modifiers: MeOH, MeOH/ACN (1:1), MeOH + 10 mM NH3, MeOH + 2 % H2O. The method optimalization was carried out on 4 stationary phases with the best selectivity and peak resolution during the screening. This optimalization involved changes in the composition of the mobile phase, gradient elution settings, back pressure regulator pressure, and column temperature. Finally, the effect of make-up solvents was evaluated. The final UHPSFC-PDA-MS method used Torus 2-PIC column, gradient elution and CO2 + MeOH/ACN (2:1) + 5 % H2O mobile phase. The make-up solvent used was MeOH + 10 mM NH3. The...

Katedra: Katedra analytické chemie Kandidát: Tatiana Vaľková Školiteľ: Prof. PharmDr. Lucie Nováková Ph.D. Názov diplomovej práce: Vývoj metódy na UHPSFC-PDA-MS analýzu ginsenosidov v potravinových doplnkoch Cieľom tejto diplomovej práce bolo vyvinúť analytickú metódu na analýzu ginsenosidov, hlavných účinných látok všehoja ázijského, v potravinových doplnkoch. K analýze bol použitý systém ultra-vysokoúčinnej superkritickej fluidnej chromatografie (UHPSFC) Acquity UPC2 v spojení s detekciou pomocou fotodiódového poľa (PDA) a hmotnostným spektrometrom (MS). Prvým krokom bol kolónový skríning 11 stacionárnych fáz (SF) v kombinácii s mobilnou fázou (MF) na báze CO2 a 4 organickými modifikátormi: MeOH, MeOH/ACN (1:1), MeOH + 10 mM NH3, a MeOH + 2 % H2O. K optimalizácii metódy boli použité 4 stacionárne fázy s najlepšou selektivitou a rozlíšením píkov v rámci skríningu. Táto optimalizácia zahrňovala zmeny v zložení mobilnej fázy, zmenu nastavenia gradientovej elúcie, tlaku regulátora spätného tlaku a teploty kolóny. Ako posledný bol hodnotený vplyv prídavných kvapalín. Finálna UHPSFC-PDA-MS metóda používala kolónu Torus 2-PIC, gradientovú elúciu a mobilnú fázu zloženú z CO2 + MeOH/ACN (2:1) + 5 % H2O. Použitou prídavnou kvapalinou bol MeOH + 10 mM NH3. Eluovaných a separovaných bolo všetkých 12...