UHPLC-MS/MS analýza vybraných potenciálních léčiv v biologickém materiálu

Abstract

Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Pharmaceutical Chemistry and Pharmaceutical Analysis Candidate: Lucie Švadlenková Supervisor - specialist: Mgr. Adam Reguli Supervisor: doc. PharmDr. Petra Štěrbová, Ph.D. Title of Thesis: HPLC-MS/MS analysis of selected drug candidates in biological materials Substances with codenames JM-298 and JM-299 are positional isomers that are currently under intensive research as potential drugs used in the treatment of metabolic and liver diseases. The aim of this work was to develop and validate the UHPLC-MS/MS method for the determination of these analytes from plasma and to determine their pharmacokinetic profile in this material after administration to mice. Several precipitating agents (acetonitrile, acidified acetonitrile, methanol and acidified methanol) were tested in plasma sample preparation (25l), where the highest recoveries and the lowest matrix effects were achieved when 250 l of methanol was used. The analysis was carried out using the UHPLC-MS/MS instrument with electrospray ionisation in positive mode. Separation was carried out using an Acquity UPLC BEH C18 (2.1×50 mm, 1.7 µm) protected with a pre-column with the same sorbent. The column oven was heated to 30 řC and the sample injection volume was 1 µl, the flow...

Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické chemie a farmaceutické analýzy Kandidát: Lucie Švadlenková Konzultant: Mgr. Adam Reguli Vedoucí diplomové práce: doc. PharmDr. Petra Štěrbová, Ph.D. Název diplomové práce: UHPLC-MS/MS analýza vybraných potenciálních léčiv v biologickém materiálu Látky s kódovým označením JM-298 a JM-299 jsou polohové izomery, které jsou v současné době předmětem intenzivního výzkumu jako potenciální léčiva používaná v léčbě metabolických a jaterních onemocnění. Cílem této práce je vyvinout a validovat UHPLC-MS/MS metodu pro stanovení těchto analytů z plazmy a stanovit jejich farmakokinetický profil v tomto materiálu po podání myším. Při úpravě vzorku plazmy (25 l) bylo zkoušeno několik precipitačních činidel (acetonitril, okyselený acetonitril, methanol a okyselený methanol), kdy nejvyšší výtěžnosti a nejnižších matricových efektů bylo dosaženo při použití 250 l methanolu. Samotná analýza probíhala za využití UHPLC-MS/MS instrumentu s ionizací elektrosprejem v pozitivním módu. Separace probíhala na koloně Acquity UPLC BEH C18 (2,1×50 mm, 1,7 µm) opatřené předkolonou se stejným typem sorbentu. Kolonový prostor byl vyhříván na 30 řC a objem nástřiku vzorku byl 1 µl, průtoková rychlost mobilní fáze 0,3 ml/min. V rámci optimalizace byly...