Optimalizace růstových podmínek pro tvorbu bakteriálního biofilmu

Abstract

Author: Bc. Veronika Rošková Supervisor: PharmDr. Miroslav Kovařík, Ph.D. Consultant: Mgr. Michaela Hympánová Title: Optimalisation of growth conditions for bacterial biofilm forming Diploma Thesis Study program: Bioanalytical laboratory diagnostics in healthcare Introduction: Biofilm is the most stable living form of bacteria. Bacteria are changing their physiology during the process of biofilm formation, so they are becoming more protected from the environmental factors. This protection leads to higher survivability in hostile conditions and higher resistance against chemical or mechanical treatment. One of the most common bacteria with the ability to produce biofilm and which causes persistent infections is Staphylococcus aureus (S. aureus). Objectives: The diploma thesis has its aim at comparing biofilm growth of S. aureus and his methicillin-resistant variant under different conditions. We observed biofilm formation in three different broths with different level of nutrition, three different types of surfaces and two different times of incubation. Methods: The microplate AlamarBlue (AB) assay was used for quantification of biofilm formation. AB is a redox indicator, which changes its colour when it is metabolised by bacteria. The colour change was observed spectrophotometrically, and...

Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Autor: Bc. Veronika Rošková Školitel: PharmDr. Miroslav Kovařík, Ph.D. Konzultant: Mgr. Michaela Hympánová Diplomová práce Název: Optimalizace růstových podmínek pro tvorbu bakteriálního biofilmu Studijní obor: Bioanalytická laboratorní diagnostika ve zdravotnictví Úvod: Biofilm je nejstabilnější formou života bakterií. Jde o strukturu, ve které jsou jednotlivé bakterie chráněny před okolními vlivy, a navíc v nich dochází ke změně fyziologie, díky které jsou bakterie schopny přežít při nevyhovujících podmínkách. Z tohoto důvodu je obtížné biofilmy odstranit a stávají se hrozbou pro okolní svět. Mezi nejobávanější patogeny tvořící biofilm patří např. Staphylococcus aureus (S. aureus). Cíl práce: Cílem práce bylo porovnat a optimalizovat růstové podmínky bakteriálního biofilmu S. aureus a jeho meticilin-rezistentní varianty. Pozorován byl vliv třech rozdílných kultivačních médií s různým stupněm výživnosti, dále vliv třech různých povrchů a dvou dob inkubace. Metody: Pro stanovení nárůstu biofilmu dvou bakteriálních kmenů S. aureus byla využita metodika AlamarBlue (AB). Jde o oxidoredukční indikátor metabolické přeměny. Barevná přeměna média indikuje utilizaci chemické látky vitálními bakteriemi....