Analýza nefrotoxického působení látek in vitro

Abstract

2020 UNIVERZITA PARDUBICE FAKULTA CHEMICKO-TECHNOLOGICKÁ Disertační práce: ANALÝZA NEFROTOXICKÉHO PŮSOBENÍ LÁTEK IN VITRO Autor práce: Mgr. Jiří Handl, Ph.D. Školitel: doc. RNDr. Tomáš Roušar, Ph.D. Abstrakt Disertační práce pojednává o charakterizaci nefrotoxického působení látek in vitro u imortalizovaných lidských proximálních tubulárních buněk HK-2. Základním cílem práce bylo zavést a optimalizovat kultivaci HK-2 buněk za různých kultivačních podmínek, charakterizovat kultivační a růstovou stabilitu HK-2 buněk a v neposlední řadě charakterizovat nefrotoxické působení kadmia u HK-2 buněčné linie pomocí bioanalytických a biochemických metod. V úvodní části práce jsou shrnuta základní pravidla a podmínky pro dlouhodobou kultivaci buněčných linií. Dále jsou podrobně charakterizovány buňky HK-2 a jejich význam v testování nefrotoxického působení. V práci jsou také zmíněny způsoby monitorování a analýzy toxického působení látek se zaměřením na stanovení buněčné viability a míry oxidačního stresu. Ve výsledkové části disertační práce jsou uvedeny výsledky získané při testování nefrotoxického působení CdCl2 u HK-2 buněk. V závěrečné části práce jsou pak naměřené výsledky shrnuty a diskutovány. Klíčová slova Nefrotoxicita; in vitro kultivace; HK-2 buněčná linie; buněčná viabilita; kadmium.

2020 UNIVERSITY OF PARDUBICE FACULTY OF CHEMICAL TECHNOLOGY Doctoral Thesis: NEPHROTOXICITY TESTING IN VITRO Author: Mgr. Jiří Handl, Ph.D. Supervisor: doc. RNDr. Tomáš Roušar, Ph.D. Abstract The doctoral thesis deals with in vitro testing of nephrotoxic effects of substances in immortalized human proximal tubular cells HK-2. The basic aim of the thesis was to introduce and optimize the cultivation of HK-2 cells under different culture conditions, to characterize the cultivation and growth stability of HK-2 cells and last but not least to characterize the nephrotoxic effect of cadmium in HK-2 cell line using bioanalytical and biochemical methods. The introduction summarizes the basic rules and conditions for long-term cultivation of cell lines. Furthermore, HK-2 cells and their importance in nephrotoxicity testing are characterized in detail. The thesis also mentions methods for monitoring toxic effects of substances with focus on measuring cell viability and oxidative stress. The outcomes of the thesis are characterizing nephrotoxic effects of CdCl2 in HK-2 cells. The results part describes obtained findings and the discussions follows. Keywords Nephrotoxicity; In vitro cultivation; HK-2 cell line; Cell viability; Cadmium.