Imunoterapie nemalobuněčného karcinomu plic založená na vakcíně na bázi dendritických buněk pulsovaných imunogenními nádorovými buňkami

Abstract

Karcinom plic patří mezi jedno z nejčastějších nádorových onemocnění na světě, které navíc dlouhodobě vykazuje velmi špatnou prognózou a vysokou mortalitou. Imunoterapie založená na využití vlastního imunitního systému pacienta v boji proti nádorovým onemocněním zažívá v současnosti v onkologii velký rozvoj a s tím i vakcíny na bázi dendritických buněk (DC). DC vakcíny pro léčbu nemalobuněčného karcinomu plic jsou však stále omezeně testovány v klinické vývoji navzdory pokrokům v technikách přípravy těchto vakcín. V této práci jsme se zaměřili na vývoj a charakterizaci DC vakcíny, kde k pulzaci nádorových antigenů byly použity nádorové linie ošetřené vysokým hydrostatickým tlakem (HHP) a cytotoxickou hypertermií (cHT). Obě fyzikální modality indukovaly imunogenní buněčnou smrt nádorových buněk, jejíž molekulární mechanismy jsme podrobně studovali. Nádorové buňky ošetřené cHT navodily částečnou profylaktickou imunitu v myším nádorovém modelu. DC vakcína pulsovaná nádorovými buňkami ošetřenými HHP nebo cHT vykazovala zralý fenotyp, zvýšenou produkci protizánětlivých cytokinů, chemotaktickou migraci a schopnost antigenní prezentace. DC vakcínu je možné vyrobit v mediu bez přídavku séra v GMP režimu pomoci standardizovaných metod. Stanovili jsme optimální hodnotu HHP a cHT ošetření, která zabíjí...

Lung carcinoma represents the leading cause of cancer mortality worldwide with dismal prognosis. Immunotherapy exploiting the patient's own immune system is booming along with dendritic cell (DC)-based immunotherapy in recent years. The use of DC-based vaccines for treatment of non-small cell lung cancer is, however, still limited with limited clinical efficacy despite the development of various techniques for the vaccine preparation. In this study, we focused on the development and characterization of DC-based vaccine pulsed with multi-antigenic tumor cells killed with high hydrostatic pressure (HHP) and cytotoxic hyperthermia (cHT). Both physical modalities induced immunogenic cell death which leads to DC activation and more efficient onset of antitumor immunity. The molecular apoptotic pathways activated upon HHP and cHT treatment in tumor cells were analyzed and the optimal conditions to achieve high mortality, high immunogenicity and low antigen degradation were identified. We also showed that the prophylactic vaccination of mice with cHT-treated tumor cells significantly delayed tumor growth and prolonged mice survival. DC pulsed with HHP or cHT-treated tumor cells exhibited phenotypic maturation, increased chemotactic migration, higher production of proinflammatory cytokines and increased...