Vývoj CE-C4D metody pro analýzu sacharidů v medu

Abstract

Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical Chemistry Candidate: Bc. Gabriela Šebestová Supervisor: PharmDr. Pavel Jáč, Ph.D. Title of the diploma thesis: Development of CE-C4D method for the analysis of saccharides in honey Honey is a commonly used natural mixture which quality must be monitored due to possible mishandling or adulteration. This diploma thesis is focused on the development of a capillary electrophoresis method with capacitively coupled contactless conductivity detection (CE-C4D) for the determination of carbohydrates in honey samples. Design of Experiments (DoE) was used to optimize the separation conditions. This approach allows to find suitable separation conditions by means of multivariate optimization. During the optimization, the impact of the following factors was investigated: the composition of the background electrolyte, the separation voltage and temperature during separation and the inner diameter of the separation capillary. Two methods were optimized: one with normal electroosmotic flow (EOF) and the other using reversed EOF after CTAB addition. The method in the normal EOF mode was used for validation and analysis of honey samples. A fused silica capillary with an inner diameter of 20 m, a total length of 48.7 cm and an effective...

Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Bc. Gabriela Šebestová Školitel: PharmDr. Pavel Jáč, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj CE-C4D metody pro analýzu sacharidů v medu Med je běžně využívaná přírodní směs, u které je nutné sledovat kvalitu kvůli možnému nesprávnému zacházení nebo falšování. Tato diplomová práce je zaměřena na vývoj metody kapilární elektroforézy s kapacitně vázanou bezkontaktní vodivostní detekcí (CE-C4D) pro stanovení obsahu sacharidů ve vzorcích medu. Pro optimalizaci separačních podmínek bylo využito plánování experimentů (DoE), které umožňuje nalezení vhodných separačních podmínek na základě multivariantní optimalizace. Během optimalizace byl zkoumán především vliv těchto faktorů: složení elektrolytu, separační napětí a teplota během separace a vnitřní průměr separační kapiláry. Byly optimalizovány dvě metody: jedna s normálním elektroosmotickým tokem (EOF) a druhá za využití obráceného EOF po přídavku CTAB. Pro validaci a analýzu vzorků medu byla využita metoda v režimu normálního EOF. Separace probíhala v křemenné kapiláře o vnitřním průměru 20 m, celkové délce 48,7 cm a efektivní délce 33,8 cm. Teplota byla 27,7 řC a napětí +16,5 kV. Jako optimální byl zvolen základní elektrolyt o koncentraci 35 mM NaOH a 15 mM...