Hodnocení jaterní toxicity in vitro

Abstract

Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Kateřina Kafuňková Vedoucí: RNDr. Jana Maixnerová, Ph.D. Název diplomové práce: Hodnocení jaterní toxicity in vitro Předmětem diplomové práce bylo hodnocení toxicity nově syntetizovaných látek na buněčném modelu reprezentujícím jaterní buňky. Testované látky byly dodány z Katedry organické a anorganické chemie, Farmaceutické fakulty v Hradci Králové, Univerzity Karlovy jakožto potencionální antifungální léčiva a léčiva účinná na Meticilin-rezistentní Staphylococcus aureus (MK-NO2-1, MK-NO2-2, DAB-5-K, PABA- Me-5, PABA-Et-5, MK-F-1, PABAN-3, PABAN-5, MK-F-2, MK-CF3-1, MK-CF3- 2). Pro stanovení toxicity byly využity dvě metody. První metoda je založena na měření metabolické aktivity buněk pomocí redukce tetrazolinu na barevný produkt. Druhá metoda detekuje množství uvolněného LDH jako markeru cytotoxicity. Jako buněčný model byla použita buněčná linie lidských buněk hepatomu HepG2. K posouzení míry viability a cytotoxicity byl použit parametr IC50 a EC50. Výsledné hodnoty za využití první metody ukázaly, že všechny testované látky vykazovaly určitou míru toxicity vůči jaterní tkáni. Nejtoxičtější látkou je MK-CF3-2. Použitý standard (amfotericin B) můžeme na základě naměřených hodnot označit za netoxickou...

Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Pharmacology and Toxicology Student: Kateřina Kafuňková Supervisor: RNDr. Jana Maixnerová, Ph.D. Title of diploma thesis: Evaluation of liver toxicity in vitro The subject of the diploma thesis is toxicity evaluation of newly synthesised substances on a cellular model representing a hepatocyte. The tested substances have been provided by the Department of Organic and Bioorganic Chemistry at the Faculty of Pharmacy in Hradec Králové, Charles University, as potential antifungal pharmaceuticals and medicine effective against Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MK-NO2-1, MK-NO2-2, DAB-5-K, PABA-Me-5, PABA-Et-5, MK-F-1, PABAN- 3, PABAN-5, MK-F-2, MK-CF3-1, MK-CF3- 2). In order to determine the toxicity we have implemented two methods. The first method is based upon measuring metabolic activity of cells by means of reducing tetrazolium to a colored product. The second method detects the amount of LDH released as a marker of toxicity. The human hepatoma cell line HepG2was used as a model. . The IC50 and EC50 parameters were used to assess the degree of viability and cytotoxicity. The final values obtained from the first method indicated all tested substances showed a certain level of toxicity to the hepatic tissue. MK-CF3-2 is the most...