The role of human heat shock protein HSP70, HSP60 and mycobacterium bovis HSP65 in pathogenesis of graft versus host disease and rheumatoid/juvenile idiopathic arthritis

Abstract

We investigated IgG antibodies against Mycobacterium bovis heat shock protein 65 (M. bovis Hsp65) fragments produced by cleavage with cyanogen bromide (CNBr) in 10 healthy controls, 11 patients with juvenile idiopathic arthritis (JIA) and 10 children with various malignant and non-malignant diseases before allogeneic stem cell transplantation (SCT) by using Western blotting (WB). CNBr cleaved M. bovis Hsp65 to three larger fragments: Pl-163, molecular weight (Mw) 17.1 kDa; P191-285, Mw 10.4 kDa and P290-534, Mw 25.3 kDa. Humoral reactivity against M. bovis Hsp65 derived fragments differed on a case-by-case basis. The sera either of JIA patients ar those befare SCT reacted with individual M. bovis Hsp65 fragments more frequently when compared with healthy controls. While IgG anti-Hsp65 antibody levels showed no significant differences between the small studied cohorts, significantly higher levels of antibodies against M. bovis Hsp65 epitopes were observed in patients befare SCT and JIA patients when compared with healthy controls. Comparing WB reflectance densities (DRl and DR2), significantly elevated antibodies against Pl-163 (DRl: p=0.014; DR2: p=0.022) and P290-534 (DRl: p=0.009; DR2: p=0.003) epitopes were found in patients befare SCT. Similarly, significantly increased DRl and DR2 values of antibodies...

Zkoumali jsme přítomnost IgG protilátek proti fragmentům teplotního šokového proteinu 65 z Mycobacterium bovis (M. bovis Hsp65), vzniklých štěpením kyanogenbromidem (CNBr), u 10 zdravých kontrol, 11 pacientů s juvenilní idiopatickou artritidou (JIA) a 10 dětí s různými maligními a nemaligními onemocněními před alogenní transplantací kmenových buněk (SCT), a to pomocí Western blottingu (WB). CNBr štěpil M. bovis Hsp65 na tři větší fragmenty: P1-163, molekulová hmotnost (Mw) 17,1 kDa; P191-285, Mw 10,4 kDa a P290- 534, Mw 25,3 kDa. Humorální reaktivita vůči těmto fragmentům se případ od případu lišila. Séra pacientů s JIA i pacientů před SCT reagovala častěji s jednotlivými fragmenty M. bovis Hsp65 ve srovnání se zdravými kontrolami. Přestože hladiny IgG protilátek proti Hsp65 neukázaly statisticky významné rozdíly mezi jednotlivými malými zkoumanými skupinami, bylo zaznamenáno významně vyšší množství protilátek proti epitopům Hsp65 u pacientů před SCT i u pacientů s JIA ve srovnání se zdravými jedinci. Při porovnání hodnot odrazové denzity WB (DR1 a DR2) byly u pacientů před SCT zjištěny významně zvýšené hladiny protilátek proti epitopům P1-163 (DR1: p = 0,014; DR2: p = 0,022) a P290-534 (DR1: p = 0,009; DR2: p = 0,003). Podobně byly u pacientů s JIA detekovány statisticky významně zvýšené hodnoty DR1 a DR2...