Vliv derivátů pyrazinu na obsah sekundárních metabolitů v in vitro kulturách rostlin II.

Abstract

Předmětem této diplomové práce bylo sledovat, zda abiotický elicitor 2,4,6-trimethyl-N- (pyrazin-2-yl)benzensulfonamid má vliv na produkci sekundárních metabolitů v kalusových a suspenzních kulturách Hypericum perforatum L. Kultivace probíhala za použití živného média dle Murashigeho a Skooga (MS) obohaceného o růstový regulátor kyselinu α-naftyloctovou o koncentraci 1 mg/l. Elicitor byl ke kulturám přidáván ve třech koncentracích: c1= 100,0 mg/100 ml; c2= 10,0 mg/100 ml; c3= 1,00 mg/100 ml. Jednotlivé vzorky se odebíraly po 6, 24, 48, 72 a 168 hodinách působení elicitoru. Kontrolní vzorky bez přítomnosti elicitoru se odebíraly po 6, 48 a 168 hodinách. Odebrané vzorky se usušily a následně zpracovaly do metanolových výluhů pro stanovení obsahu sekundárních metabolitů (rutinu, hyperosidu a kvercetinu) pomocí HPLC analýzy. Bylo sledováno i uvolňování těchto metabolitů do živných médií. Elicitací byla ovlivněna produkce sekundárních metabolitů hlavně v kalusových kulturách, kde bylo naměřeno několik statisticky významných hodnot nárůstu jejich produkce. Nejvyšší obsah rutinu (0,169 mg/g DW) byl naměřen v kalusové kultuře po 168 hodinách působení elicitoru v koncentraci c1= (3,6057x 10-3 mol/l). Vyšší obsah hyperosidu byl naměřen u kalusové kultury po 6 hodinách působení elicitoru v koncentraci c2=...

The main purpose of the theses was to find if the abiotic elicitor 2,4,6-trimethyl-N-(pyrazine- 2-yl)benzenesulfonamide has any influence on the secondary metabolites production in callus and suspension cultures of Hypericum perforatum L. The cultivation was taking place in the Murashige a Skoog (MS) nutrient medium enriched by the growth regulator - alpha-naphthyl acetic acid at the concentration of 1 mg.L-1 . The elicitor was added to the cultures at the three levels of concentration: c1= 100.0 mg/100 ml; c2= 10.0 mg/100 ml; c3= 1.00 mg/100 ml. The individual samples were taken after 6, 24, 48, 72 and 168 hours of the elicitor application. The control samples without the elicitor were taken after 6, 48 and 168 hours. The collected samples were dried and subsequently transformed into methanol extracts in order to determine secondary metabolites content (rutin, hyperoside and quercetin) by HPLC method. Release of these metabolites into nutrient media was also subject of this observation. The elicitation has influenced production of the secondary metabolites, particularly in callus cultures, wherein several statistically significant values, characterizing increase in their production, were measured. The highest content of rutin (0.169 mg.g-1 DW) was determined in callus culture after 168 hours when...