Vliv glukózy na expresi endoglinu a biomarkerů endotelové dysfunkce u endotelových buněk

Abstract

Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biological and Medical Sciences Title of Diploma Thesis: Effect of glucose treatment on endoglin and biomarkers of endothelial dysfunction in endothelial cells Author: Adriana Adamcová Supervisor of Diploma Thesis: prof. PharmDr. Petr Nachtigal, Ph.D. Background: The aim of this thesis was to evaluate the expression of endoglin and biomarkers of endothelial dysfunction (eNOS, VCAM-1) in aortic endothelial cells exposed to oscillating glucose. Methods: Human aortic endothelial cells (HAECs) were treated with alternating normal (5 mM) and high (25mM) glucose for 7 days. The control group, was treated with a constant level of normal glucose. Gene expression of endoglin, eNOS, VCAM-1, HIF1α, KLF6, RELA and LXR was measured by quantitative real-time PCR. Flow cytometry was used to detect endoglin and VCAM-1 protein levels. Results: Treatment with high levels of glucose resulted in significantly increased expression of endoglin, eNOS, VCAM-1, HIF1α, RELA and LXR by means of PCR. The flow cytometry method showed a significant difference in protein levels in both endoglin and VCAM-1. Conclusions: The results of this diploma thesis showed that oscillating glucose increases the expression of endoglin and other biomarkers of endothelial...

Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Název diplomové práce: Vliv glukózy na expresi endoglinu a biomarkerů endotelové dysfunkce u endotelových buněk Autor: Adriana Adamcová Vedoucí diplomové práce: prof. PharmDr. Petr Nachtigal, Ph.D. Cíl práce: Cílem této diplomové práce bylo vyhodnotit expresi endoglinu a biomarkerů endotelové dysfunkce (eNOS, VCAM-1) u lidských aortálních endotelových buněk, které byly vystaveny působení oscilující glukózy. Metody: Pro tuto práci byly použity lidské aortální endotelové buňky (HAEC), které byly po dobu 7 dní vystaveny působení média střídavě s normální (5 mM) a vysokou (2 mM) glukózou. K porovnání výsledků sloužila kontrolní skupina, která byla po celou dobu vystavena konstantní hladině normální glukózy. Genová exprese endoglinu, eNOS, VCAM-1, HIF1α, KLF6, RELA a LXR byla změřena metodou real-time PCR. Pro změření proteinové hladiny endoglinu a VCAM-1 byla použita metoda průtokové cytometrie. Výsledky: Metoda PCR prokázala signifikantní zvýšení mRNA expresi endoglinu, eNOS, VCAM- 1, HIF1α, RELA a LXR u buněk exponovaných vysoké hladině glukózy ve srovnání s kontrolní skupinou. Metodou průtokové cytometrie byl zaznamenán signifikantní rozdíl v proteinové hladině endoglinu i VCAM-1. Závěr: Výsledky této...