Analýza steroidů ze skupiny androgenů a glukokortikoidů pomocí UHPSFC-MS/MS
Analysis of steroids from the group of angrogens and glucocorticoids using UHPSFC-MS/MS
diplomová práce (OBHÁJENO)
Zobrazit/ otevřít
Trvalý odkaz
http://hdl.handle.net/20.500.11956/117419Identifikátory
SIS: 205645
Kolekce
- Kvalifikační práce [6393]
Autor
Vedoucí práce
Oponent práce
Chocholouš, Petr
Fakulta / součást
Farmaceutická fakulta v Hradci Králové
Obor
Odborný pracovník v laboratorních metodách
Katedra / ústav / klinika
Katedra analytické chemie
Datum obhajoby
3. 6. 2020
Nakladatel
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci KrálovéJazyk
Čeština
Známka
Výborně
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Taťána Gazárková Školitel: prof. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Název diplomové práce: Analýza steroidů ze skupiny androgenů a glukokortikoidů pomocí UHPSFC-MS/MS Cílem této práce bylo vyvinout a optimalizovat metodu pro separaci směsi 37 steroidů pomocí ultra-vysokoúčinné superkritické fluidní chromatografie s hmotnostní detekcí (UHPSFC-MS/MS). Analýzy probíhaly s využitím systému Acquity UPC2 s hmotnostním detektorem typu trojitého kvadrupólu Xevo TQ-XS firmy Waters. V prvním kroku byla nezbytná důsledná charakterizace prekurzorů jednotlivých analyzovaných látek s následným provedením Skenu produktových iontů a výběru vhodných SRM přechodů. Steroidy jsou izomerní a vzájemně izobarické látky poskytující často stejné prekurzorové ionty ([M+H]+ , [M+H-H2O]+ , případně [M+H-2H2O]+ ) nebo obdobná fragmentační spektra. To je komplikováno skutečností, že ne vždy je nejintenzivnějším iontem spektra právě [M+H]+ , ale třeba i [M+H-H2O]+ iont, který je zároveň izobarickou m/z pro úplně jinou látku. Po pečlivém výběru SRM přechodů byla dále provedena optimalizace podmínek iontového zdroje pro pozitivní i negativní mód. V dalším kroku byl proveden screening 18 stacionárních fází. Gradientová eluce využívala CO2...
Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical Chemistry Candidate: Taťána Gazárková Supervisor: prof. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Title of Diploma Thesis: Analysis of steroids from the group of androgens and glucocorticoids using UHPSFC-MS/MS The goal of this study was to develop and optimize an analytical method for the separation of 37 steroids mixture by the ultra-high performance supercritical fluid chromatography hyphenated to mass spectrometry (UHPSFC-MS/MS). Analysis was carried out using Waters Acquity UPC2 system coupled to Xevo TQ-XS mass spectrometer. In the first step it was necessary to consistently characterize the precursor ions of each analyte. Then, the Product ion scan was carried out and proper SRM transitions were chosen. Steroids are isomeric and isobaric substances that often provide the same precursor ions ([M+H]+ , [M+H-H2O]+ , eventually [M+H-2H2O]+ ), or similar fragmentation spectra. This is complicated by the fact that most intense ion of the spectrum is not always [M+H]+ , but also [M+H-H2O]+ ion which is simultanously isobaric m/z for a completely differnt compoud. After careful selection of SRM transitions, the conditions of the ion source were optimized for both positive and negative modes. In the next step, the screening of 18...