Kvantitavní detekce exprese genu WT1: prognostický význam a sledování reziduální nemoci u dětských hematologických onemocnění

Abstract

Význam exprese genu WT1 v blastech akutních leukémií a MDS byl opakovaně prověřován s nejednoznačnými výsledky. V naší studii jsme se zaměřili na stanovení exprese WT1 pomocí kvantitativní PCR ve vzorcích dětských pacientů s akutními leukémiemi, myelodysplastickým syndromem, aplastickou anémií a anaplastickým velkobuněčným lymfomem. Jako kontroly byly vyšetřeny vzorky kostních dření zdravých dárců, vzorky pupečníkových krví a vzorky regenerující se kostní dřeně, které exprimují gen WT1 na velice nízké nebo nedetekovatelné hladině. Exprese genu WT1 v blastech akutních myeloidních i lymfoblastických leukémií se pohybovala v širokém rozpětí. Vysoká exprese byla u lymfoblastických leukémií spojena s přítomností hybridního genu MLL/AF4, zatímco BCR/ABL a TEL/AML1 pozitivní pacienti měli expresi nízkou. T buněčné lymfoblastické leukémie exprimovaly gen WT1 na vyšších hladinách než pacienti s B buněčnou akutní lymfoblastickou leukémií. U myeloidních leukémií byla vysoká exprese spojena s méně zralými subtypy (zejména se subtypem M3), naopak leukémie subtypu M5 exprimovaly gen WT1 na signifikantně nízkých hladinách. Statisticky signifikantně horší prognózu jsme nalezli u dětí s ALL s velmi vysokou a s velmi nízkou expresí genu WT1. U dětských pacientů s AML jsme nalezli signifikantně lepší přežití bez leukémie pro...

The significance of WT1 gene expression in blasts of acute leukemias and myelodysplastic syndrome (MDS) has been repeatedly studied, though with inconsistent results. In our study, we focused on determining WT1 expression using quantitative PCR in samples from pediatric patients with acute leukemias, myelodysplastic syndrome, aplastic anemia, and anaplastic large cell lymphoma. Control samples included bone marrow from healthy donors, umbilical cord blood samples, and regenerating bone marrow samples, which express the WT1 gene at very low or undetectable levels. WT1 gene expression in blasts of both acute myeloid and lymphoblastic leukemias showed a wide range of values. In lymphoblastic leukemias, high expression was associated with the presence of the MLL/AF4 fusion gene, whereas patients positive for BCR/ABL and TEL/AML1 showed low WT1 expression. T-cell lymphoblastic leukemias exhibited higher levels of WT1 expression than B-cell acute lymphoblastic leukemias. In myeloid leukemias, high expression was associated with less differentiated subtypes (particularly subtype M3), whereas M5 subtype leukemias expressed WT1 at significantly lower levels. A statistically significant worse prognosis was observed in children with ALL who had either very high or very low WT1 expression. In pediatric AML patients,...