Chromatografické hodnocení amiodaronu a jeho aktivního metabolitu

Abstract

76 Abstrakt Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra: Farmaceutické chemie a farmaceutické analýzy Kandidát: Mgr. Iva Kopecká Školitel: PharmDr. Pavla Pilařová, Ph.D. Název diplomové práce: Chromatografické hodnocení amiodaronu a jeho aktivního metabolitu Cílem této rigorózní práce byla optimalizace stávající HPLC metody používané ve FN HK pro stanovení amiodaronu a jeho aktivního metabolitu v biologickém materiálu. Nalezená metoda HPLC probíhala na koloně Waters Symetry C18, 150 x 4,6 mm, 5 μm, mobilní fáze: acetonitril : 25mM fosforečnanový pufr v poměru 55:45, průtok 1,4 ml/min při teplotě 45řC, nástřik 5 µl, UV detekce při 242 nm. Tato metoda byla následně převedena na UHPLC - kolona Phenomenex Kinetex C18, 100 x 2,1 mm, 1,7 μm, mobilní fáze: acetonitril : 25mM fosforečnanový pufr v poměru 55:45, průtok 0,3 ml/min při teplotě 45řC, nástřik 5 µl, UV detekce při 242 nm. Pro případnou detekci hmotnostním detektorem byla tato UHPLC metoda upravena - na stejné UHPLC koloně, mobilní fází byl acetonitril : 0,1% kyselina mravenčí v poměru 55:45, průtok 0,3 ml/min při teplotě 45řC, nástřik 5 µl, UV detekce při 242 nm. Zároveň byla optimalizována i izolace vzorku z plazmy, resp. séra. Nejlepší výtěžnosti bylo dosaženo po přidání 4 µl 10% síranu zinečnatého ke vzorku plazmy a...

77 Abstract Charles University in Prague, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department: Pharmaceutical Chemistry and Pharmaceutical Analysis Candidate: Mgr. Iva Kopecká Tutor: PharmDr. Pavla Pilařová, Ph.D. Name of Degree Paper: Chromatographic evaluation of amiodaronu and its active metabolite The main purpose of this thesis was to optimize the existing HPLC method used in University Hospital Hradec Králové for determination of amiodarone and its active metabolite in biological material. For this HPLC method was used Waters Symetry C18 column, 150 x 4,6 mm, 5 µm, mobile phase: acetonitrile: 25 mM phosphate buffer (55:45), flow rate 1,4 ml/min, at 45 ř C, injection 5 µl, UV detection at 242 nm. This method was subsequently transferred to a UHPLC using Phenomenex Kinetex C18 column, 100 x 2,1 mm, 1,7 µm, mobile phase: acetonitrile: 25 mM phosphate buffer (55:45), flow rate 0,3 ml/min, at 45 ř C, injection 5 µl, UV detection at 242 nm. This UHPLC method was modified for eventual detection by mass detector using same UHPLC column, mobile phase: acetonitrile: 0,1% formic acid (55:45), flow rate 0,3 ml/min, at 45 ř C, injection 5 µl, UV detection at 242 nm. At the same time plasma, resp. serum sample isolation was optimized. The best result was achieved by adding 4 µl of 10% zinc sulfate to the plasma sample...