In vitro metody pro predikci penetrace látek přes HEB

Abstract

Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Helena Zálešáková Školitel: PharmDr. Marie Vopršálová, CSc. Název diplomové práce: In vitro metody pro predikci penetrace látek přes HEB Tato diplomová práce se zabývá korelací mezi dvěma in vitro modely simulujícími hematoencefalickou bariéru (HEB, z angl. hematoencephalic barrier) a jejich porovnáním z hlediska praktického využití. Jedná se o metodu PAMPA (Parallel Artificial Membrane Permeability Assay) a metodu využívající MDCK (Madin-Darby Canine Kidney) buněčnou linii, což jsou modely pro screening látek potenciálně penetrujících do centrálního nervového systému (CNS, z angl. central nervous system). V rámci této práce byl změřen set šestnácti standardních léčiv. Vlastní provedení bylo podobné u obou metod s cílem získat informaci o tom, jaké množství testovaných látek prostoupí přes membránu z donorové části destičky do akceptorové. Koncentrace v donorové části byla změřena pomocí UV-VIS spektrofotometrie. Hlavní odlišností mezi metodami je membrána, přes kterou látky prostupují. V případě PAMPA se používá fosfolipid, který byl izolován z mozku vepře (PBL, z angl. polar brain lipid). Tento lipid simuluje fosfolipidovou membránu endotelu mozkových...

Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Pharmacology & Toxicology Student: Helena Zálešáková Supervisor: PharmDr. Marie Vopršálová, CSc. Title of diploma thesis: In vitro Methods for the Prediction of Blood Brain Barrier Penetration This thesis deals with the correlation between two in vitro models simulating the blood- brain barrier (HEB, hematoencephalic barrier) and their comparison in terms of practical use. These are the PAMPA (Parallel Artificial Membrane Permeability Assay) method and the MDCK (Madin-Darby Canine Kidney) cell line, which are models for potential central nervous system (CNS) penetration screening. Within this work, a set of sixteen standard drugs were measured. The procedure was similar in both methods in order to obtain information on the amount of test substances passing through the membrane from the donor portion of the plate to the acceptor. The concentration in the donor portion was measured by UV-VIS spectrophotometry. The main difference between these methods is the membrane through which the substances penetrate. In the case of PAMPA, a lipid solution that has been isolated from pig brain (PBL, polar brain lipid) is used. This lipid simulates the phospholipid membrane of the brain capillary endothelium. In the MDCK model, the membrane...