Separácia tokoferolov s využitím HPLC techniky

Abstract

Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Michaela Hutníková Školitel: doc. RNDr. Lenka Kujovská Krčmová Ph.D. Názov diplomové práce: Separácia tokoferolov s využitím HPLC techniky Vitamín E predstavuje osem príbuzných zlúčenín α, β, γ, δ-tokoferolov (nasýtený fytylový postranný reťazec) a α-, β-, γ-, δ-tokotrienolov (nenasýtený fytylový postranný reťazec). Najviac študovaný izomér bol v minulosti α-tokoferol a bol opísaný jeho protizápalový a proliferatívny účinok. Preto väčšina štúdií zameraných na prevenciu rakoviny bola zameraná na α-tokoferol. Súčasné výskumné štúdie opisujú dôležitú úlohu γ a δ tokoferolov pri proliferácii buniek, protizápalovej a nádorovej záťaži. Tiež sa preukázalo, že γ-tokoferol inhibuje tumorogenézu hrubého čreva, prostaty, prsníka a pľúc na zvieracích modeloch, čo naznačuje, že má vysoký potenciál pri prevencii rakoviny u ľudí. V tejto štúdii bola vyvinutá nová citlivá metóda na analýzu α, β, γ, δ-tokoferolov pomocou techniky vysokoúčinnej kvapalinovej chromatografie (HPLC). Všetky merania sa uskutočnili na chromatografickom systéme HPLC Prominence LC 20, Shimadzu (Kyoto, Japonsko). Počas vývoja metód boli testované kolóny typu core-shell-Kinetex (Torrance, USA) s rôznymi stacionárnymi fázami (Biphenyl,...

Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical Chemistry Candidate: Michaela Hutníková Supervisor: assoc. prof. RNDr. Lenka Kujovská Krčmová Ph.D. Title of diploma thesis: Separation of tocopherols using HPLC technique Vitamin E represents eight related compounds α, β, γ, δ-tocopherols (saturated phytyl side chain) and α, β, γ, δ-tocotrienols (unsaturated phytyl side chain). α-tocopherol was the most studied isomer in the past and its anti-inflammation and proliferative effect was described. Therefore most of cancer prevention trials have been focused on α-tocopherol. Present research studies have described the important role of γ and δ-tocopherols in cell proliferation, anti-inflammation and tumor burden. Also it has been demonstrated that γ-tocopherol inhibits colon, prostate, mammary and lung tumor genesis in animal models, suggesting to have a high potential in the prevention of human cancer. In this study the novel sensitive method for analysis of α, β, γ, δ-tocopherols was developed using the High Performance Liquid Chromatography (HPLC) technique. All the measurements were carried out on the chromatographic system HPLC Prominence LC 20, Shimadzu (Kyoto, Japan). During the method development core-shell columns-Kinetex (Torrance, USA) with different...