Modulační účinek cis-nerolidolu, trans-nerolidolu a farnesolu na vybrané enzymy 1. fáze biotransformace v lidských jaterních řezech

Abstract

Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Bc. et Bc. Kristýna Deingruberová Školitel: doc. PharmDr. Iva Boušová, Ph.D. Název diplomové práce: Modulační účinek cis-nerolidolu, trans-nerolidolu a farnesolu na vybrané enzymy 1. fáze biotransformace v lidských jaterních řezech Seskviterpeny jsou přírodní látky, které můžeme najít v alternativních léčivech či doplňcích stravy. Nicméně ne všichni zástupci působí na zdraví blahodárně. Existují totiž poznatky o vážných toxicitách a vedlejších účincích, kterým by se měla věnovat dostatečná pozornost. Cílem této diplomové práce bylo zjistit, jestli mají acyklické seskviterpeny cis-nerolidol (cNER), trans-nerolidol (tNER) a farnesol (FAR) modulační účinek na proteinovou a genovou expresi vybraných enzymů 1. fáze biotransformace - čtyři isoformy cytochromu P450 (CYP), jmenovitě CYP1A2, CYP2B6, CYP2C a CYP3A4, karbonylreduktasa 1 (CBR1) a aldo-ketoreduktasa 1C3 (AKR1C3). Zkoumaným materiálem byly ultratenké lidské jaterní řezy pocházející od pěti pacientů obou pohlaví ve věku od 45 do 81 let. Jaterní řezy byly inkubovány se studovanými látkami v koncentraci 10 μM (u jednoho pacienta cNER a tNER i v koncentraci 30 μM) při teplotě 37 řC po dobu 24 hodin. Proteinovou expresi jsem stanovovala pomocí elektroforézy s Western...

Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biochemical Sciences Bc. et Bc. Kristýna Deingruberová Supervisor: doc. PharmDr. Iva Boušová, Ph.D. Title of diploma thesis: Modulatory effect of cis-nerolidol, trans-nerolidol and farnesol on selected phase 1 drug-metabolizing enzymes in human liver slices Sesquiterpenes are natural compounds which can be found in alternative medicines or food supplements. However, not all representatives have a beneficial effect on health. Indeed, sufficient attention should be paid to the evidence of serious toxicities and side effects. The aim of this diploma thesis was to find out, whether acyclic sesquiterpenes cis-nerolidol (cNER), trans-nerolidol (tNER) and farnesol (FAR) possess a modulatory effect on protein and gene expression of selected phase 1 drug-metabolizing enzymes - four cytochrome P450 (CYP) isoforms, namely CYP1A2, CYP2B6, CYP2C and CYP3A4, carbonyl reductase 1 (CBR1) and aldo-ketoreductase 1C3 (AKR1C3). The ultra-thin liver slices from five patients of both sexes aged 45 to 81 years were used as studied material. The liver slices were incubated with studied compounds at a concentration of 10 µM (in one patient, cNER and tNER also at 30 µM concentration) at 37 řC for 24 hours. The protein expression was determined by...