Charakterizace redukce flubendazolu u člověka in vitro

Abstract

Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Mgr. Jana Štěpánková Vedoucí rigorózní práce: Prof. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D. Název rigorózní práce: Charakterizace redukce flubendazolu u člověka in vitro Flubendazol (FLU) je anthelmintikum benzimidazolového typu, používané k léčbě a prevenci helmintóz hospodářských i volně žijících zvířat. FLU je také registrován pro léčbu parazitóz způsobených střevními hlísticemi u lidí. Mechanismus jeho účinku spočívá ve specifické vazbě na tubulin, která naruší strukturu a funkci mikrotubulů. Výhodou tohoto léčiva je i nízká systémová toxicita. Proto se nyní studuje i jeho aktivita protinádorová. Cílem této rigorózní práce bylo charakterizovat redukci FLU v lidských jaterních subcelulárních frakcích, protože tyto informace v dostupné literatuře dosud chybí. Byla studována stereospecifita, subcelulární lokalizace, preference koenzymů, enzymová kinetika redukce FLU a aktivita enzymů, které se redukce FLU účastní. Výsledky měření prokázaly, že FLU je více redukován v cytosolu a je preferován redukovaný koenzym nikotinamidadenindinukleotidfosfát (NADPH). Redukce FLU je u člověka striktně stereospecifická, protože FLU byl redukován pouze na (+)-enantiomer FLUR. Při studiu enzymové kinetiky redukce FLU v cytosolu,...

ASBSTRACT Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biochemical Sciences Candidate: Mgr. Jana Štěpánková Supervisor: Prof. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D. Title of Thesis: Characterization of flubendazol reduction in human in vitro Flubendazole (FLU) is an anthelmintic of the benzimidazole type used as a treatment or prophylaxis of helminthoses in livestock and wild animals. FLU is also registered for the treatment of parasitic diseases caused by intestinal nematodes in humans. Its mechanism of action lies in its specific binding to tubulin, which disrupts the structure and function of microtubules for the therapy of parasitosis in humans. The advantage of this drug is also the low systemic toxicity. That is why the anticancer activity of FLU is now under study. The aim of this rigorous work was to characterize the reduction of FLU in human liver subcellular fractions as this information is still lacking in available literature. Stereospecificity, subcellular localization, preference of coenzymes, enzyme kinetics of FLU reduction, and activity of enzymes involved in FLU reduction were studied in this project. Measurement results have shown that FLU is predominantly reduced in cytosol and nicotinamide adenine dinucleotide phosphate reduced (NADPH) coenzyme is preferred. FLU...