HPLC analýza léčiv

Abstract

Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biofyziky a fyzikální chemie Kandidát: Tomáš Kouřil Konzultant: Ing. Vladimír Kubíček, CSc. Název diplomové práce: HPLC analýza léčiv Diplomová práce popisuje hledání nejvhodnějších podmínek pro separaci dvou enantiomerů léčiv betaxololu a bisoprololu pomocí metody HPLC. Cílem bylo najít vhodnou isokratickou separační metodu pro tyto látky po extrakci z plazmy, která by mohla být využita při farmakokinetických experimentech. Byla použita kolona Daicel Chiralcel ® OD-R 4,6 mm x 250 mm. Nejlepších výsledků bylo dosaženo se složením mobilní fáze acetonitrilu a vodného roztoku chloristanu sodného (1 molární) v poměru 50:50 pro betaxolol a poměru 35:65 pro bisoprolol. Kolona byla termostatována na 25 řC. Během experimentů byla používána UV detekce (λ = 190 nm). Jako vnitřní standardy byly testovány tramadol a 0-desmethyltramadol. Dále byla zkoušena metoda LLE pro zpracování biologických vzorků před provedením vlastní HPLC.

Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biophysics and Physical Chemistry Candidate: Tomas Kouril Consultant: Ing. Vladimir Kubicek, CSc. Title of Thesis: HPLC analysis of Drugs The diploma thesis describes selection of the most suitable conditions for determination of a two enantiomers of drugs betaxolol and bisoprolol with a method HPLC. The aim of the thesis was to find a suitable isocratic method for the substances for extraction from plasma. The chromatographic column Daicel Chiralcel ® OD-R 4,6 mm x 250 m was utilized. The best results were achieved with mobile phase consisting of acetonitrile and aqueous solution of sodium perchlorate (1 molar) in volume ratio 50:50 for betaxolol and 35:65 for bisoprolol. The column was thermostated at 25 řC. UV detection (λ = 190 nm) was applied to get a sufficient sensitivity. Tramadol and O-desmethyltramadol was tested as an internal standard. Biological samples were tested by LLE before the HPLC analyses. Furthermore, the LLE method for biological samples was tested before performing HPLC.