Vývoj a validace HPLC metod pro stanovení obsahu konzervačních látek v léčivých přípravcích

Abstract

4 ABSTRAKT Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Barbora Harmáčková, DiS. Školitel: doc. PharmDr. Ludmila Matysová, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj a validace HPLC metod pro stanovení obsahu konzervačních látek v léčivých přípravcích Tato diplomová práce byla zaměřena na vývoj a validaci metod pro stanovení obsahu konzervačních látek v léčivých přípravcích, zejména thiomersalu a benzalkonium- chloridu. Při vývoji se vycházelo ze 2 HPLC metod, které pro benzalkonium-chlorid používají směs methanolu a 7,5 mM roztoku fosforečnanu draselného v poměru 68 : 32 a pro thiomersal směs methanolu a fosfátového pufru v poměru 65 : 35 : 0,9. Vývoj metod pro obě zmíněné látky spočíval hlavně v optimalizaci složení mobilní fáze a teplotních podmínek analýzy. Byla přitom sledována především délka analýzy a dále rozlišení a symetrie píků stanovovaných látek. V konečné verzi HPLC metody pro benzalkonium- chlorid byla zvolena izokratická eluce s mobilní fází MetOH : K3PO4 ( pH 3, 7,5 mM) v poměru 73 : 27 při teplotě 50řC. V konečné verzi pro thiomersal byla použita HPLC metoda se stejným složením mobilní fáze jako v předlohové studii, ale průtok byl zvýšen z 0,6 ml/min na 1 ml/min pro zrychlení analýzy a zlepšení symetrie píku. Validace prokázala, že metody poskytují...

5 ABSTRACT Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical Chemistry Candidate: Barbora Harmáčková, DiS. Supervisor: doc. PharmDr. Ludmila Matysová, Ph.D. Title of the diploma thesis: Development and validation of HPLC methods for determination volume of preservatives in pharmaceutical formulations This diploma thesis is focused on the development and validation of methods for determination of preservative content in medicinal products, especially thiomersal and benzalkonium chloride. The development was based on the HPLC methods used for benzalkonium chloride a mixture of methanol and 7.5 mM potassium phosphate in a ratio of 68:32 and for a thiomersal mixture of methanol and phosphate buffer in a ratio of 65: 35: 0.9. The development of the methods for both mentioned substances consisted mainly in optimizing the composition of the mobile phase and the temperature conditions of the analysis. In particular, the length of the analysis and the resolution and symmetry of the peaks of the substances being determined were monitored. In the final version of the HPLC method for benzalkonium chloride an isocratic elution with the mobile phase of MetOH: K3PO4 (pH 3, 7.5 mM) in a ratio of 73: 27 was chosen at 50 ř C. In the final version for thiomersal, an HPLC method with the same...