Metabolismus fosfolipidů při tvorbě strukturovaných kolonií kvasinek
Phospholipid metabolism in the formation of structured yeast colonies
diplomová práce (OBHÁJENO)
Zobrazit/ otevřít
Trvalý odkaz
http://hdl.handle.net/20.500.11956/85682Identifikátory
SIS: 159317
Kolekce
- Kvalifikační práce [20073]
Autor
Vedoucí práce
Oponent práce
Heidingsfeld, Olga
Fakulta / součást
Přírodovědecká fakulta
Obor
Genetika, molekulární biologie a virologie
Katedra / ústav / klinika
Katedra genetiky a mikrobiologie
Datum obhajoby
8. 6. 2017
Nakladatel
Univerzita Karlova, Přírodovědecká fakultaJazyk
Čeština
Známka
Výborně
Klíčová slova (česky)
strukturované kolonie, INO1, OPI1, Northern analýza a imunodetekce, 2-bromooktanová kyselinaKlíčová slova (anglicky)
structured colonies, INO1, OPI1,northern analysis and immunodetection, 2-bromoctanoic acidKvasinky ve svém přirozeném prostředí tvoří strukturované kolonie. To jim umožňuje lépe se přizpůsobit okolním podmínkám, ale také snáze odolávat různým typům inhibitorů kvasinkové infekce. S morfologií kolonií úzce souvisí metabolismus fosfolipidů. Důležitým genem metabolismu fosfolipidů je INO1, který kóduje inositol-3-fosfátsyntázu. Exprese genu INO1 je regulovaná negativním transkripčním faktorem Opi1p, který ovlivňuje i řadu dalších genů pro enzymy metabolismu fosfolipidů, je nezbytný i pro expresi genu FLO11, jehož produkt Flo11p je esenciální pro tvorbu strukturované kolonie. Hlavním cílem mé práce bylo pozorovat souvislosti mezi morfologií kolonií přírodního kmene Saccharomyces cerevisiae a metabolismem fosfolipidů. Zjistila jsem, že exprese genu INO1 i morfologie kolonií se mění vlivem zdroje uhlíku i působením selenanu či inhibitoru β-oxidace mastných kyselin 2-bromooktanové kyseliny. I když gen INO1 pro buňku není esenciální, jeho delece nebo nadměrná exprese způsobuje změny v metabolismu fosfolipidů a morfologii kolonie. Vlivem selenanu a 2-bromooktanové kyseliny se také mění exprese genu FLO11, což se odráží na strukturovanosti kolonie. Kyselina 2-bromooktanová je proto perspektivním agens proti kvasinkovým infekcím.
Yeasts in their natural environment form structured colonies. This allows them to better adapt to environmental conditions, but also to more easily resist various types of yeast infection inhibitors. The metabolism of phospholipids is closely related to the morphology of colonies. An important gene involved in phospholipid metabolism is INO1, which encodes inositol-3- phosphate synthase. Expression of the INO1 gene is regulated by the Opi1p negative transcription factor, which also affects a number of other genes for phospholipid metabolism enzymes, is also necessary for the expression of the FLO11 gene, encoding Flo11p, which is essential to the formation of a structured colony. The main aim of my work was to investigate the correlation between colony morphology of a natural strain of Saccharomyces cerevisiae and phospholipid metabolism. I have found that changes in INO1 gene expression and colony morphology are influenced by carbon source, selenate activity and the inhibitor of β-oxidation, 2-bromooctanoic acid. Although the INO1 gene is not essential for cell viability, its deletion or overexpression causes changes in phospholipid metabolism and colony morphology. Selenate and 2-bromooctanoic acid also alter expression of the FLO11 gene, which is reflected in colony structure. Thus, 2-...