Využití alternativních mobilních fází pro metodu Hydrofilní interakční chromatografie

Abstract

Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Barbora Münsterová Školitel: doc. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Název diplomové práce: Využití alternativních mobilních fází pro metodu Hydrofilní interakční chromatografie Tato diplomová práce se zabývala možnostmi využití 1,3-dioxolanu jako alternativní organické složky mobilní fáze v hydrofilní interakční chromatografii. Byly porovnávány změny v selektivitě a účinnosti separace při použití dioxolanu a acetonitrilu jako organických složek mobilní fáze. Jako vodná složka pro klasickou HILIC byl použit 0,5 % roztok kyseliny octové nebo 50 mM octan amonný pH 3,8, pH 6,8 a pH 9,8. Pro nevodnou HILIC bylo testováno složení mobilní fáze acetonitril- dioxolan, accetonitril-dioxolanový roztok 0,5 % kyseliny octové a acetonitril-dioxolan modifikovaný vodným roztokem 50 mM octanu amonného pH 6,8. Pro měření na koloně ACQUITY UPLC BEH Amide (1,7 µm, 2,1 mm x 100 mm, Waters) bylo využito 5 různých skupin látek, a to fenolických kyselin, purinových a pyrimidinových bází, derivátů pyridinu, vitaminů rozpustných ve vodě a skupiny betablokátorů. Byla hodnocena retence, selektivita a rychlost separace. Měření probíhalo na přístroji ACQUITY Ultra Performance LC za detekce pomocí PDA detektoru při vlnové délce...

Charles University in Prague, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of analytical chemistry Candidate: Barbora Münsterová Supervisor: doc. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Title of Diploma thesis: Application of alternative mobile phases in Hydrophilic interaction chromatography method. This thesis was focused on the possibilities of using 1,3-dioxolan as an alternative organic component of the mobile phase in HILIC. The changes in selectivity and efficiency of the separation were observed when using dioxolan and acetonitrile as the organic components of the mobile phase. 0.5 % acetic acid or 50 mM ammonium acetate pH 3.8, pH 6.8 and pH 9.8 were used as the aqueous components for the conventional HILIC. The mobile phase consisting of acetonitrile-dioxolan, acetonitrile-dioxolan with 0.5 % acetic acid and acetonitrile- dioxolan modified with 50 mM ammonium acetate aqueous solution pH 6.8 were tested for non-aqueous HILIC. For the measurements on column ACQUITY UPLC BEH Amide (1.7 µm, 2.1 mm x 100 mm, Waters) 5 different groups of compounds were used, including of phenolic acids, purine and pyrimidine bases, pyridine derivates, water-soluble vitamins and beta-blockers. Retention, selectivity and the speed of analysis were competed. Measurements were performed using ACQUITY Ultra Performance...