Stanovení disociačních konstant a limitních mobilit vybraných amfolytů
Determination of dissociation constants and limiting mobilities of some ampholytes
bachelor thesis (DEFENDED)
View/ Open
Permanent link
http://hdl.handle.net/20.500.11956/50420Identifiers
Study Information System: 98342
Collections
- Kvalifikační práce [19066]
Author
Advisor
Referee
Beneš, Martin
Faculty / Institute
Faculty of Science
Discipline
Clinical and Toxicological Analysis
Department
Department of Physical and Macromolecular Chemistry
Date of defense
7. 9. 2011
Publisher
Univerzita Karlova, Přírodovědecká fakultaLanguage
Czech
Grade
Excellent
Keywords (Czech)
kapilární zónová elektroforéza, disociační konstanta, limitní mobilita, amfolytyKeywords (English)
capillary zone electrophoresis, dissociation constant, limiting mobility, ampholytesKapilární zónová elektroforéza je jednoduchá a automatizovaná metoda, která umožňuje stanovit aciditní disociační konstanty a limitní iontové mobility analytů ze stejné série experimentů za malé spotřeby vzorku. Závislost efektivních mobilit 7 vybraných amfolytů na pH pufru byla experimentálně zjištěna v rozsahu pH 1,6 až 6,8. Sada jednoduchých pufrů s konstantní iontovou silou byla navržena pomocí programu PeakMaster. Analyzované amfolyty byly detekovány bezkontaktním vodivostním detektorem. Použitím dynamického potahování kapiláry se minimalizovala interakce analytů se silanolovými skupinami na vnitřní stěně kapiláry. Experimentálně zjištěné hodnoty efektivních mobilit byly proloženy (fitovány) vhodnou funkcí. Získanými parametry byly aktuální mobility a smíšené disociační konstanty odpovídající příslušné iontové síle. Pomocí rozšířeného Debye- Hückelova zákona s lineárním členem a Onsagerova zákona byly tyto hodnoty přepočítány na termodynamické disociační konstanty a limitní iontové mobility amfolytů. Klíčová slova: kapilární zónová elektroforéza, disociační konstanta, limitní mobilita, amfolyty
Capillary zone electrophoresis is a simple and automated method which enables simultaneous determination of the dissociation constants and limiting ionic mobilities of the analyte from one series of experiments. The small consumption of the sample is main advantage of this method. The dependence of the effective mobilities of 7 selected ampholytes on pH in the range of 1.6 to 6.8 was measured. A set of simple buffers with constant ionic strength and satisfactory buffering capacity was designed using computer program PeakMaster. The ampholytes were detected by contactless conductivity detector. Dynamic capillary coating was used to minimize interactions of analytes with silanol groups on the inner wall of the capillary. Experimentally obtained effective mobilities were fitted with the suitable function. Actual mobilities and the mixed dissociation constants corresponding to the actual ionic strength were parameters of the regression function. Thermodynamic dissociation constants and limiting ionic mobility of ampholytes were calculated using the extended Debye-Hückel law with the linear member and the Onsager law. Key words: capillary zone electrophoresis, dissociation constant, limiting mobility, ampholytes