Purifikace rekombinantních proteinů pomocí afinitní chromatografie
Purification of recombinant proteins by affinity chromatography
bachelor thesis (DEFENDED)
View/ Open
Permanent link
http://hdl.handle.net/20.500.11956/39620Identifiers
Study Information System: 89811
Collections
- Kvalifikační práce [19613]
Author
Advisor
Referee
Hrdý, Ivan
Faculty / Institute
Faculty of Science
Discipline
Molecular Biology and Biochemistry of Organisms
Department
Department of Cell Biology
Date of defense
16. 9. 2010
Publisher
Univerzita Karlova, Přírodovědecká fakultaLanguage
Czech
Grade
Very good
Keywords (Czech)
afinitní chromatografie, rekombinantní protein, purifikace, afinitní tagKeywords (English)
affinity chromatography, recombinant protein, purification, affinity tagIzolace a purifikace rekombinantních proteinů je základním předpokladem pro studium jejich strukturních a funkčních vlastností. Mezi nejdůležitější metody, které jsou k tomuto účelu využívány patří afinitní chromatografie. V této práci jsou shrnuty v literatuře publikované vlastnosti a zkušenosti s využitím nejpoužívanějších afinitních tagů. Zde probrané tagy zahrnují:CBP, MBP, GST, polyhistidinové a polyargininové tagy, FLAG-tag, Strep-tag II a SpA a některé jejich modifikace. U jednotlivých tagů je probrán jejich původ a vlastnosti, vliv na formu a lokalizaci fúzního proteinu, způsob jeho vazby a eluce ze substrátu a možnosti jeho odstranění nebo využití v jiných metodách. Klíčová slova: afinitní chromatografie, rekombinantní protein, purifikace, afinitní tag
The isolation and purification of recombinant proteins is essential for further study of their structural and functional properties. The affinity chromatography is usually the method of choice for this task. In this paper the most used affinity tags are reviewed for their properties and experience with their application. The tags covered here include CBP, MBP, GST, polyhistidine and polyarginine tags, FLAG-tag, Strep-tag II and SpA. The origin and properties of the tags, their influence on form and localization of fusion protein as well as binding, elution and removal are discussed. Keywords: affinity chromatography, recombinant protein, purification, affinity tag