Katepsin C z krevničky Schistosoma mansoni

Abstract

Krevničky rodu Schistosoma způsobují schistosomosu, jedno z nejzávažnějších parazitárních onemocnění. Kathepsin C (EC 3.4.14.1), trávicí enzym krevničky, je jedním z potenciálních cílů terapeutického zásahu. Tato cysteinová proteasa nebyla dosud detailně studována. V bakalářské práci byla detekována aktivita kathepsinu C v extraktu z dospělé krevničky střevní (S. mansoni) a krevničky jaterní (S. japonicum). Byla určena inhibiční specifita těchto enzymů s využitím sady selektivních inhibitorů savčích kathepsinů. Kathepsiny C byly vizualizovány na elektroforetických gelech pomocí proteomické fluorescenční značky. Dále byl připraven rekombinantní kathepsin C (SmCC) z krevničky střevní (S. mansoni) homologní expresí v kvasince Pichia pastoris.

Blood flukes of the genus Schistosoma cause schistosomiasis, one of the most serious parasitic diseases. Cathepsin C (EC 3.4.14.1) is a digestive enzyme of the blood flukes and a potential drug target. This cysteine protease has not been studied in detail yet. In this thesis, cathepsin C activity was detected in the extract of adult blood flukes S. mansoni and S. japonicum. Inhibitory specificity of these enzymes was determined using of set of selective inhibitors of mammalian cathepsins. Cathepsins C were visualized on SDS-PAGE gels with fluorescent proteomic probe. Furthermore, recombinant cathepsin C of S. mansoni (SmCC) was prepared by homologous expression in the yeast Pichia pastoris. (In Czech)