Testování vlastností nových "fused-core" analytických kolon v UHPLC systému a porovnání s BEH UHPLC analytickými kolonami

Abstract

Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Analytické chemie Kandidát: Jitka Nežádalová Školitel: PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Název diplomové práce: Testování vlastností nových "fused - core" analytických kolon v UHPLC systému a porovnání s BEH UPLC analytickými kolonami Tato diplomová práce byla zaměřena na testování vlastností nových analytických kolon naplněných povrchově porézními částicemi, tzv. fused-core analytických kolon, v UHPLC systému v porovnání s BEH UPLC analytickou kolonou. Testovány byly kolony Kinetex PFP o velikosti částic 1,7 µm a 2,6 µm (Phenomenex) a Ascentis Express Phenyl-hexyl o velikosti částic 2,7 µm (Sigma-Aldrich), tedy kolony s povrchově porézními částicemi a kolona Acquity BEH Phenyl (Waters) s celkově porézními částicemi o velikosti 1,7 µm. K porovnání vlastností kolon bylo použito 7 estrogenních steroidů za detekce pomocí PDA detektoru při vlnové délce 280 nm. Měření probíhalo za využití isokratické eluce. Mobilní fáze se skládala z ultračisté vody a acetonitrilu. Kolony byly hodnoceny z hlediska účinnosti, symetrie píků, rozlišení a zpětného tlaku, který vznikal na kolonách. Účinnost kolon byla vyjádřená v počtu teoretických pater a znázorněním van Deemterovy křivky. Dále byl sledován vliv rostoucí teploty a průtoků na separaci...

Charles University in Prague, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical chemistry Candidate: Jitka Nežádalová Supervisor: PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Title of Diploma thesis: Evaluation of properties of new "fused - core" analytical columns in UHPLC system and a comparison with the BEH UPLC analytical columns This thesis was focused on testing properties of new analytical columns filled with porous shell particles (so-called fused-core) in UHPLC system and a comparison with the BEH UPLC analytical column. The following analytical columns were tested: Kinetex PFP particle size of 1,7 µm and 2,6 µm (Phenomenex) and Ascentis Express Phenyl-Hexyl particle size of 2,7 µm (Sigma- Aldrich), which are columns with porous shell particles and Acquity BEH Phenyl column with totally porous particles size of 1,7 µm. To compare the properties of the columns, 7 estrogen steroids were used using PDA detector at a wavelength of 280 nm for detection. Measurements were carried out using isocratic elution. The Mobile phase consisted of ultrapure water and acetonitrile. Columns were evaluated in terms of efficiency, peak symmetry, resolution and the back pressure, which was generated on the columns. The efficiency of the columns was expressed as a number of theoretical plates and by van Deemter...