Membránové vlastnosti neurálních kmenových/progenitorových buněk v průběhu in vitro diferenciace a po transplantaci do mozku potkana
Membrane properties of neural stem/progenitor cells during in vitro differentiation and after transplantation into the rat brain
dizertační práce (OBHÁJENO)
Zobrazit/ otevřít
Trvalý odkaz
http://hdl.handle.net/20.500.11956/32509Identifikátory
SIS: 95730
Kolekce
- Kvalifikační práce [1710]
Autor
Vedoucí práce
Oponent práce
Vyklický, Ladislav
Mazurová, Yvona
Fakulta / součást
2. lékařská fakulta
Obor
-
Katedra / ústav / klinika
Mimofakultní pracoviště
Datum obhajoby
4. 10. 2010
Nakladatel
Univerzita Karlova, 2. lékařská fakultaJazyk
Čeština
Známka
Prospěl/a
Cilem této pn\ce bylo obj~nl mechanismů diferenciace neurálnlch kmenovýchfprogenitorových buněk in l'Uro a jejich pfdlvání a diferenciace po transplantaci do poSkOWlé kůry mozku potkana. Pro identifikaci buněk byla použita imWlooistocbcmicU analým a změny v CJlpre5i Na' II K' napěťov! 2:livi$lých iootových kanál.1l. a recepton1 byly sledovány pomoci metody patch<lamp. Uk:mIli jsme, že NE-4C imonilizované neuráJ.nf kmenové buňky, které byly lJskány z neuroepitelia !l5J~eficientnlch mytich cmbryí devátý embryonální den (E9) II OlJUlčerly zeleným fluorescenčním proteinem (GFPINE-4C), majl schopnost diferenciace v nelll'Olly in vitro. Po tTIU1.~plnn"'lCi do fotochcmic~ lézc dávajl tyto buflky vznik llCurom1m, aSlrocyto.m i oligodendrocytOrn. Dále byly použily primAmi embryonálnl kmenové bui'iky i7.0lo\'lIné z embryi D6!CiFP myti, které oprimujl GFP pod D6 promotorem mDachJ genu. který se uplatJ\uje pti vývoji mozkové kňl')' a je specificlcy exprimován v neurnlnlch kmcoových buňkách mo7.kové kůry a ve v7.niklých neuronech, V EI2 obsahuje mozko," ktlra II těchto Iny~1 prevMllě proliferujlc/ neunilnl kmenové bullky, kleré je tak moroo na zákl!ldl: fluorescence GF!' izolovat. Uk:mIli jsme, 2e in \';"0 diferencujI tytO kmenové buňky ptevážnt v neurony, ale dávaj í YI.nik i GFAP (glial fibrilary lICidic...
AOSTRACT The aim oflhis .....orl:. was to elucidate the dilTercntiation mechanisms of neural stcmlpmgenitor cells in vitro and their potentiallO survive and ditfcn:ntiate in \'il'o, al\er trarlSplnntatioo into thc injured mt conex. IImnunohistochcmistI)' "'lIS used for cell idcntiticatioos. and lhe p'0pCl ties ofK' aod Na' voltagc-gated ion ehnnnels were studiC<! using the pat,h-(:Iamp teclmique, We Ilave demonstrnted lhal inunortalised green lluort:SCCnll)r()lein (GFP)INE-4C neural stem cells derivtXI fmm tbc neurocpithelium of p5l'<lctieicm mouse cmbryos iII cmbryonic day (E)9 are ablc to dilferentiate i"to !leUrQns in \1"0, After tmnsplantalioo illto the site of a photlxhcmical lC'iion of aduh rol5, GFP!NE4C cdls slIn'ive and give Tise to neurons. astrocytt5 and oHgodmdrocytcs. Prima!)' embryonic ncura.l Slem cells were isoLaled frum O6IGFP ntice, in which GFP is expressed un(\cr tbc IXlfItrol of06. 11 promoter of thc mDachl gene. which is in\'Olved in tbe development of Ihc concx. At E1 2. D6 is specifically exprcssed in loc neurd.! stem cclLs of the (\(nal tclcnocephalon. from whieh cortical neurons arise, We have shown lila! D61GFP neurJI stem odLs isolated fmm 1312 embfyos are able to give rlse to neuroos and glial fibrillary acidic protcin (GFAP)-posilivc cel1s ill \'i"o nnd that after...