Poruchy kmenových buněk v myším modelu Diamondovy-Blackfanovy anémie
Hematopoietic stem and progenitor cell defects in transgenic model of Diamond-Blackfan anemia
diploma thesis (DEFENDED)
View/ Open
Permanent link
http://hdl.handle.net/20.500.11956/176511Identifiers
Study Information System: 219834
Collections
- Kvalifikační práce [20073]
Author
Advisor
Referee
Valášek, Leoš
Faculty / Institute
Faculty of Science
Discipline
Immunology
Department
Department of Cell Biology
Date of defense
12. 9. 2022
Publisher
Univerzita Karlova, Přírodovědecká fakultaLanguage
Czech
Grade
Excellent
Keywords (Czech)
Diamondova-Blackfanova anémie, Rps19, Trp53, myší model, erytropoéza, hematopoéza, RNA sekvenováníKeywords (English)
Diamond-Blackfan anemia, Rps19, Trp53, mouse model, erythropoiesis, hematopoiesis, RNA sequencingDiamondova-Blackfanova anémie (DBA) je vzácné vrozené onemocnění kostní dřeně, které je charakterizováno poruchami ve vývoji erytrocytů a bývá doprovázena širokou škálou jiných defektů. Je způsobena mutací v některém z genů ribozomálních proteinů, ve čtvrtině všech případů se jedná o gen RPS19. Mechanismus vzniku patologie této nemoci není dosud přesně znám. Pro lepší porozumění vztahu genotypu a fenotypu u DBA byl vytvořen myší model s homozygotní mutací vysoce konzervovaného argininu 67 (Rps19R67Δ/R67Δ ). Myší model s touto mutací vykazuje mnoho fenotypových příznaků odpovídajících těm, kterými trpí pacienti s DBA. V této diplomové práci se zaměřujeme na charakterizaci hematopoetických a erytropoetických vlastností tohoto myšího modelu. Prokázali jsme, že myši trpí anémií a k poruchám erytropoézy dochází ve stádiu proerytroblastů. V hematopoéze jsme pozorovali změny již od stádia multipotentních progenitorů. Role proteinu p53 v patogenezi DBA je již dlouho známá. Pracovali jsme proto i s modelem Rps19R67Δ/R67Δ Trp53-/- , na kterém jsme pozorovali záchranu fenotypu. Erytropoéza ani hematopoéza nebyla u tohoto myšího modelu narušena. Pomocí transkriptomické analýzy jsme prokázali, že u Rps19R67Δ/R67Δ myší dochází ke zvýšené expresi několika genů, které jsou všechny součástí p53 signální dráhy,...
Diamond-Blackfan anemia (DBA) is a rare congenital bone marrow failure syndrome characterized by deficient development of erythroid progenitors and accompanied by a variable set of developmental defects. About 25 % of patients have mutations of the small ribosomal subunit protein RPS19, and the precise mechanism of single aminoacidic mutations of RPS19 protein in the pathology of Diamond-Blackfan anemia remains largely unknown. To understand the interaction between of genotype and phenotypic variability we have created a mouse model with homozygous mutation in a highly conserved arginine 67 (Rps19R67Δ/R67Δ ). Mouse model with this mutation display many of the same phenotypical trades as patients with DBA. We decided to focus on hematopoiesis and erythropoiesis in this mouse model and tried to characterize those processes. We discovered that Rps19R67Δ/R67Δ mice similarly to DBA patients suffer from anemia and that the erythropoiesis process is disrupted at the stage of proerythroblasts. We also observed changes in hematopoiesis in stages as early as multipotent progenitors. The role of p53 protein as a modifier of DBA phenotype is well known. We created mouse model with p53 depletion to assess the role of p53 protein in relation with mutation in Rps19. Rps19R67Δ/R67Δ Trp53-/- mice show no signs of...