IN VITRO assays for investigating nucleic acid delivery.

Abstract

Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra biochemických vied University of Vienna, Faculty center for Pharmacy, Department of Pharmaceutical Chemistry, Laboratory of MacroMolecular Cancer Therapeutics Kandidát: Dajana Mihaličoková Školiteľ (Univerzita Karlova): PharmDr. Anna Jirkovská, Ph.D. Školiteľ (University of Vienna): Univ.Prof. Dipl. Ing. Dr. Manfred Ogris Konzultant (University of Vienna): Dr. Haider Sami, Ph.D. Názov diplomovej práce: Hodnotenie transfekcie nukleových kyselin v in vitro podmienkach Kľúčové slová: transfekcia, úprava zostrihu, BCA test, polyplexy Jednou z najdôležitejších úloh súčasného biomedicínskeho výskumu je nájsť správnu cestu ako vyliečiť rakovinu, genetické choroby a iné choroby, ktoré sú stále nevyliečiteľné. Voči tomu, génová terapia je vynikajúca ako potencionálna liečba pomocou ktorej je možné dopraviť genetický materiál do bunky. Reportérové gény založené na transfekčnom procese môžu byť použité na štúdium génovej expresie. Transfekcia je sprostredkovaná pomocou vektorov, buď to virovými alebo nevirovými. Nevirové vektory ponúkajú mnoho výhod oproti virovým proťajškom v jednoduchšej príprave, sú pomerne lacné a najdôležitejšia je ich neimunogénnosť. Kationické polyméry založené na polyethylenimine tvoria komplexy s plazmidovou DNA...

Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové, Department of Biochemical Sciences University of Vienna, Faculty center for Pharmacy, Department of Pharmaceutical Chemistry, Laboratory of MacroMolecular Cancer Therapeutics Candidate: Dajana Mihaličoková Supervisor (Charles University): PharmDr. Anna Jirkovská, Ph.D. Supervisor (University of Vienna): Univ.Prof. Dipl. Ing. Dr. Manfred Ogris Co-supervisor (University of Vienna): Dr. Haider Sami, Ph.D. Title of diploma thesis: In vitro assays for investigating nucleic acid assay Keywords: transfection, splice correction, BCA assay, polyplexes One of the most important tasks of biochemical research is to find out the right way how to cure cancer, genetic disorders and other illnesses which are still not curable. Towards this, gene therapy is emerging as a potential treatment owing to its ability to deliver genetic material inside the cell. Reporer gene based transfection process can be used to study gene expression. Transfection is mediated by vectors, either of viral or non-viral origin. Non-viral vectors offer several advantages over the viral counterparts like easier to synthesize, relatively cheap and the most important is their non-immunogenicity. Cationic polymers based on polyethylenimine form complexes with plasmid DNA reffered to as...