Vliv methylviologenu na produkci sekundárních látek v in vitro kultuře Fagopyrum esculentum, odrůda Bambi

Abstract

9 ABSTRAKT Předmětem této práce bylo hodnocení vlivu abiotccého elicitoru na producci secundárních metabolitů v in vitro culturách pohancy obecné. Cílem bylo zjisttt zda methylviologen zvyšuje producci rutnu v calusových a suspenzních culturách Fagopyrum esculentum Moench var. Bambi. Pocus byl proveden na culturách cultvovaných na živném médiu podle Murashigeho a Scooga s přídavcem 2t4-dichlorfenoxyoctové cyseliny (2t4-D) o concentraci 1 mg/l jaco růstového regulátoru. Ke culturám byl přidáván 1 ml ethanoliccého roztocu methylviologenu ve třech různých concentracích: c1 = 100t0 mg/100 mlt c2 = 10t0 mg/100 ml a c3 = 1t0 mg/100 ml a byly elicitovány po dobu 6t 12t 24t 48t 72 a 168 hodin. Ke controlním vzorcům (bez přídavcu elicitoru) byl přidán 1 ml ethanolu 96 % a vzorcy byly odebírány po 6t 24t 72 nebo 168 hodinách. Po uplynulé době byly cultury odebrányt vysušeny a uschovány pro pozdější stanovení obsahu rutnu. Předmětem práce byla i analýza vylučování rutnu do živného média. Obsah rutnu ve všech vzorcích byl později vyhodnocen pomocí HPLC. V této práci nebyl pozorován žádný zásadní nárůst v producci rutnu culturami pohancy po expozici elicitorem. Maximální obsah rutnut cterý byl detecovánt byl 0t1 mg/g DWt tedy spodní hranice detecovatelnostt a byl nalezen v suspenzních culturách ve třech případech; při...

10 ABSTRACT The subject of this study was to evaluate the efect of abiotc elicitor on rutn producton in callus and suspension cultures of buckwheat. The cultvar of buckwheat used for this research was Fagopyrum esculentum Moench var. Bambi, cultvated in Murashige and Skoog nutrient medium with the additon of growth regulator 2,4-dichlorfenoxyacetc acid (2,4-D) in concentraton of 1 mg/l. The elicitor used in this study was a soluton of methylviologen, 1 ml of it was added to the cultures in three diferent concentratons: c1 = 100.0 mg/100 ml, c2 = 10.0 mg/100 ml and c3 = 1.0 mg/100 ml. The elicitor was afectng the cultures for 6, 12, 24, 48, 72 or 168 hours. Afer the defned period of tme, cultures were collected, dried out and stored for further analysis of rutn content. To control samples (without elicitor treatment) 1 ml of ethanol 96% was added and they were collected afer 6, 24, 72 or 168 hours. Releasing of rutn into the nutrient medium was also investgated. Rutn content in each sample of cultures and in each sample of nutrient medium was later determined by HPLC. Any signifcant increase in the producton of rutn was not observed in this study. The maximum amount of rutn detected was 0.1 mg/g DW, thus the lowest quantty detectable, and was found in suspension cultures in three cases, afer the additon of...