Molekulární diagnostika ptačích schistosom při nákaze přirozených i náhodných hostitelů

Abstract

Ptačí schistosomy rodu Trichobilharzia patří mezi významné původce kožní hypersenzitivní reakce zvané cerkáriová dermatitida. Tito parazité využívají jako mezihostitele plicnaté plže z čeledi Lymnaeidae, a jako definitivní hostitele především kachnovité ptáky. První larvální stádium, miracidium, ve vodě aktivně vyhledává a penetruje mezihostitelského plže, ve kterém se vyvíjí v mateřskou sporocystu. Vytvářejí se dceřiné sporocysty migrující do hepatopankreatu plže, kde dochází k asexuální produkci velkého množství cerkárií. Ve vodním prostředí cerkárie opouští mezihostitele, aktivně vyhledávají a penetrují do kůže definitivního hostitele. V jeho těle dospívají a produkují vajíčka. Cerkárie však mohou penetrovat do kůže savců, včetně člověka, kde dochází k jejich rychlé eliminaci imunitním systémem za vzniku zánětlivé reakce. Dosud neexistuje spolehlivá metoda, která by u lidí byla schopná odlišit cerkáriovou dermatitidu od jiných hypersenzitivních kožních reakcí a zároveň pomocí které by bylo možné spolehlivě diagnostikovat trichobilharziózu u kachen. Hlavním cílem této práce bylo, za použití molekulárních metod diagnostikovat nákazu ptačími motolicemi u experimentálně nakažených přirozených (kachen) i náhodných hostitelů (myší, lidí). Za účelem optimalizace experimentů byla pomocí konvenční PCR...

Bird schistosomes of the genus Trichobilharzia are known as causative agents of hyper-immune skin reaction called cercarial dermatitis (swimmer's itch). They use pulmonary water snails from family Lymnaeidae as the intermediate host and mostly anatid birds as the definitive host. The first larva, miracidium, actively moves in water environment, penetrates the snail and develops to the mother sporocyst. Then the daughter sporocysts are formed and migrate to the hepatopancreas of the snail where the high number of cercariae is assexually produced. Cercariae leave the intermediate host, actively move in a water and penetrate the skin of definitive host. Within a host body they mature and lay eggs. Cercariae can penetrate also the mammalian skin, including human, where they are immediately eliminated by the immune system of the host, which is followed by inflammatory reaction. Until now, for humans, there is no effective method enabling to differ cercarial dermatitis from other hyper-immune skin reactions and for birds the reliable diagnostic method of trichobilharziasis is missing. The main aim of this thesis was to use the molecular methods for diagnostic of bird schistosomes infection in natural (ducks) and accidental hosts (mice, human). For optimization, the conventional PCR was used for detection...