Show simple item record

G pretein-couplad receptors in membrane domains
dc.contributor.advisorSvoboda, Petr
dc.creatorRudajev, Vladimír
dc.date.accessioned2018-04-18T14:15:35Z
dc.date.available2018-04-18T14:15:35Z
dc.date.issued2007
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/20.500.11956/95950
dc.description.abstractConclusions our purposewastoseparďeplasmamembranefractioncharacterisedaslipid rafu (or mernbranedomains)andítndtheextentofG protein coupledreceptors(GPCRs) raft association.Threediffererrttechniqueswere applied- detergontextraction,alkaline treaÍnent wift sonicďion,andhomogenisation'We foundtha on|yTriton X.l00 treatmentledto lipid raffs separďon from bulk membranephase.Many markermoleculeshelpedus to characterise low (sucrose|5.25%)andhigh-density(sucrose40%)membranefractionsseparďedon sucrosederrsitygraďents after cells homogenisation'ďkďine or detergentextraction.Low density,dercrgentresisiantmembranefragnents, were characterisedby presenceof mernbranedomainsproteinscaveolin,flotillin, andGPl-boundalkalinephosphatase,CD55, CD58, andCD59, whereashigh-densitysucrosegradientfractionwereenrichedin non-raft proteinsNA/K-ATPase' MHC l' cDl47' calnexinandtrarsferrinerec€ptoÍ'Using alkaline extractionandhomogenisation(detergent-freemethods)ďd notprovide membranedomains separatedfromnon.raflphaseofplasmamembrane. Inadditiontovariousmarkerproteins,gradientdistributionsof GPCRs andtrimericG proteinGso, GqďGl lo', Gil,2a andGp wereanalysedaswell' Innon.deteÍgent prepaÍations,all monitoredproteinsco.localísedin gradientfractionsrepresenting35-4070 sucÍose.on theotherhand,appIicationof TritonX. l 00 enabledus to...en_US
dc.description.abstractZávér Nďím cilem bylo isolovat frakci plasmatickémembránycharakterisovanoujako lipidové rafý (membránovédomény)a naléá míru asociace receptorůspřažených s trimemími G proteiny (GPCRs) s těmito membránoými strukturami. Pro separaci raftů jsme použilitři různépostupy- detergentovouextrakci,alkalickou preparacise sonikaci a mechanickouhomogenisaci.Zjistilijsme, žepouzeaplikace Tritonu X-l00 vedla k oddělení lipidových raftůod většinovémembrálové fáze.Pro charakterisacihustotníchsacharosov'ých gradientůzískaných z homogenáhr"alkalického čidetergentovéhoextraktu jsme použili celou řadu bílkovin vys\Áujících sepo centrifugaciv oblastechgradientuodpovidajicich sacharosámo nízké(15.25%)i lrysoké(40%)hustotě.Nizkohustotní,detergentresistentní membriínovéfragmený byly charakterisovány přítomnostíproteinůmembrrí'rrovýchdomén caveolinu,flotillinu a GPI vrizanýchalkalickéfosfatasy,cD55' cD58 a CD59, zatímco vysokohustotnígradientovéfrakce obsahovalypřevážnouvětšinuneraftov'ýchproteinůNďK- ATPasy, MHc I' cDl47' calnexinu a transferinovéhoreceptoru.Alkalická extrakceani homogenisacebuněčnéhomateriálunevedlak isolaci membránovýchdoménoddělenýchod nedoménovéfaze plasmatickémembrány. Kromě ruzrrých,'markerov.ých..proteinůjsme analysovalipředevšímgradientové distribucetrimerníchG proteinůGsa, Gqcr/Gl lo, Gil '2a' GB a...cs_CZ
dc.languageČeštinacs_CZ
dc.language.isocs_CZ
dc.publisherUniverzita Karlova, Přírodovědecká fakultacs_CZ
dc.titleReptory spřažené s trimérními G proteiny v membránových doménáchcs_CZ
dc.typedizertační prácecs_CZ
dcterms.created2007
dcterms.dateAccepted2007-04-24
dc.description.departmentDep. of Physiology and Develop. Biology (obsolete)en_US
dc.description.departmentKatedra fyziol. živočichů a vývoj. biol. (zrušena)cs_CZ
dc.description.facultyPřírodovědecká fakultacs_CZ
dc.description.facultyFaculty of Scienceen_US
dc.identifier.repId112308
dc.title.translatedG pretein-couplad receptors in membrane domainsen_US
dc.contributor.refereeNováková, Olga
dc.contributor.refereeTeisinger, Jan
dc.identifier.aleph001226849
thesis.degree.namePh.D.
thesis.degree.leveldoktorskécs_CZ
thesis.degree.disciplineAnimal physiologyen_US
thesis.degree.disciplineFyziologie živočichůcs_CZ
thesis.degree.programBiologyen_US
thesis.degree.programBiologiecs_CZ
uk.faculty-name.csPřírodovědecká fakultacs_CZ
uk.faculty-name.enFaculty of Scienceen_US
uk.faculty-abbr.csPřFcs_CZ
uk.degree-discipline.csFyziologie živočichůcs_CZ
uk.degree-discipline.enAnimal physiologyen_US
uk.degree-program.csBiologiecs_CZ
uk.degree-program.enBiologyen_US
thesis.grade.csProspělcs_CZ
thesis.grade.enPassen_US
uk.abstract.csZávér Nďím cilem bylo isolovat frakci plasmatickémembránycharakterisovanoujako lipidové rafý (membránovédomény)a naléá míru asociace receptorůspřažených s trimemími G proteiny (GPCRs) s těmito membránoými strukturami. Pro separaci raftů jsme použilitři různépostupy- detergentovouextrakci,alkalickou preparacise sonikaci a mechanickouhomogenisaci.Zjistilijsme, žepouzeaplikace Tritonu X-l00 vedla k oddělení lipidových raftůod většinovémembrálové fáze.Pro charakterisacihustotníchsacharosov'ých gradientůzískaných z homogenáhr"alkalického čidetergentovéhoextraktu jsme použili celou řadu bílkovin vys\Áujících sepo centrifugaciv oblastechgradientuodpovidajicich sacharosámo nízké(15.25%)i lrysoké(40%)hustotě.Nizkohustotní,detergentresistentní membriínovéfragmený byly charakterisovány přítomnostíproteinůmembrrí'rrovýchdomén caveolinu,flotillinu a GPI vrizanýchalkalickéfosfatasy,cD55' cD58 a CD59, zatímco vysokohustotnígradientovéfrakce obsahovalypřevážnouvětšinuneraftov'ýchproteinůNďK- ATPasy, MHc I' cDl47' calnexinu a transferinovéhoreceptoru.Alkalická extrakceani homogenisacebuněčnéhomateriálunevedlak isolaci membránovýchdoménoddělenýchod nedoménovéfaze plasmatickémembrány. Kromě ruzrrých,'markerov.ých..proteinůjsme analysovalipředevšímgradientové distribucetrimerníchG proteinůGsa, Gqcr/Gl lo, Gil '2a' GB a...cs_CZ
uk.abstract.enConclusions our purposewastoseparďeplasmamembranefractioncharacterisedaslipid rafu (or mernbranedomains)andítndtheextentofG protein coupledreceptors(GPCRs) raft association.Threediffererrttechniqueswere applied- detergontextraction,alkaline treaÍnent wift sonicďion,andhomogenisation'We foundtha on|yTriton X.l00 treatmentledto lipid raffs separďon from bulk membranephase.Many markermoleculeshelpedus to characterise low (sucrose|5.25%)andhigh-density(sucrose40%)membranefractionsseparďedon sucrosederrsitygraďents after cells homogenisation'ďkďine or detergentextraction.Low density,dercrgentresisiantmembranefragnents, were characterisedby presenceof mernbranedomainsproteinscaveolin,flotillin, andGPl-boundalkalinephosphatase,CD55, CD58, andCD59, whereashigh-densitysucrosegradientfractionwereenrichedin non-raft proteinsNA/K-ATPase' MHC l' cDl47' calnexinandtrarsferrinerec€ptoÍ'Using alkaline extractionandhomogenisation(detergent-freemethods)ďd notprovide membranedomains separatedfromnon.raflphaseofplasmamembrane. Inadditiontovariousmarkerproteins,gradientdistributionsof GPCRs andtrimericG proteinGso, GqďGl lo', Gil,2a andGp wereanalysedaswell' Innon.deteÍgent prepaÍations,all monitoredproteinsco.localísedin gradientfractionsrepresenting35-4070 sucÍose.on theotherhand,appIicationof TritonX. l 00 enabledus to...en_US
uk.file-availabilityV
uk.publication-placePrahacs_CZ
uk.grantorUniverzita Karlova, Přírodovědecká fakulta, Katedra fyziol. živočichů a vývoj. biol. (zrušena)cs_CZ


Files in this item

Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail

This item appears in the following Collection(s)

Show simple item record


© 2017 Univerzita Karlova, Ústřední knihovna, Ovocný trh 3-5, 116 36 Praha; email: dspace (at) is.cuni.cz

Za dodržení všech ustanovení autorského zákona jsou zodpovědné jednotlivé složky Univerzity Karlovy. / Each constituent part of Charles University is responsible for adherence to all provisions of the copyright law.

Upozornění / Notice: Získané informace nemohou být použity k výdělečným účelům nebo vydávány za studijní, vědeckou nebo jinou tvůrčí činnost jiné osoby než autora. / Any retrieved information shall not be used for any commercial purposes or claimed as results of studying, scientific or any other creative activities of any person other than the author.

DSpace software copyright © 2002-2015  DuraSpace
Theme by 
@mire NV