Úloha Na+/H+ antiporterů plasmatické membrány ve fyziologii kvasinkových buněk

Abstract

) r Nhal-type antiporterswith differentsubstratespeciÍicity(or affinityto individualsubstrates) andfunctions.One of themis involvedin thedetoxificationof cells andtheothercouldplay an importantrole in the maintenanceof stableintracellularpotassiumcontent,cell volume andpH of thecýoplasmthanlsto its abilitytotransportK+. At this time, no yeast speciespossessingsolely a Na*/fI*antiporterwith narrow substratespecificity (for Na* and Li) is known;therefore,the physiologicalrole of Nhal- type antiportersseemsto be complexwith a participationboth in the eliminationof toxic cationsfromcells andin themaintenanceof stableintracellularK* concentration,cell volume andcýoplasmic pH. 4.Summary Themainresultsof thethesíscanbesummarizedas: o The studiesof sequencesof yeastalkali metalcation/Iťantiporters(Nhal, Nhxl andKhal families)in silico showedthatthe structureof all threegroupsof theseproteinsprobably contains 12 transmembranesegments,we found some conservedamino acid residuesor motifslikely to be importantforproperfunctioningof antiporters,andourphylogeneticstudy revealedthatNhxl proteinsare relatedto both plant and mammalianNa*/Iť antiporters, Khal antiportersare close to thebacterialrelativesandNhal-type proteinsform a soparate goup so far characteizedonly in yeastsor fungi. o The D. hanseniiNHAI geneencodesa...

Souhrn _____________________________________________________________________________________________________________ 60 5. SOUHRN Souhrn _____________________________________________________________________________________________________________ 61 Nejdůležitější výsledky získané v rámci této disertační práce, která přispěla k porozumění fyziologické roli kvasinkových Na+ /H+ antiporterů plasmatické membrány, je možno shrnout do těchto bodů: 1. Studium kvasinkových Na+ /H+ antiporterů na úrovni jejich sekvencí (publikace č. 1) ukázalo, že struktura všech tří skupin antiporterů (Nha1, Nhx1 i Kha1) pravděpodobně obsahuje 12 transmembránových segmentů, v sekvencích proteinů jsme nalezli některé konzervované aminokyseliny či motivy, jež by mohly být významné pro aktivitu antiporterů, a námi provedená fylogenetická studie ukázala, že proteiny Nhx1 jsou příbuzné savčím a rostlinným Na+ /H+ antiporterům, proteiny Kha1 se zdají být nejpříbuznější s bakteriálními antiportery a Na+ /H+ antiportery plasmatické membrány (rodina Nha1) tvoří oddělenou vývojovou větev, jejíž představitelé byli doposud charakterizováni jen v houbových organismech. 2. Gen DhNHA1 kvasinky D. hansenii kóduje Na+ /H+ antiporter plasmatické membrány se širokou substrátovou specifitou (publikace č. 2). Tento protein se tedy může v D. hansenii...