Zobrazit minimální záznam

Recombinant Fragments of Antibodies
dc.contributor.advisorSedláček, Juraj
dc.creatorKrál, Vlastimil
dc.date.accessioned2019-05-03T14:38:33Z
dc.date.available2019-05-03T14:38:33Z
dc.date.issued2008
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/20.500.11956/92479
dc.description.abstract6. CoNct usloN The aim of the thesis was to establish, in the national conditions, technology of preparation of antibody reconrbinant fragrnents and to verífo the cornplete procedure using several model monoclonal antibodies with a potential diagnostic and therapeutic use. For tfuee antibodies' mAb TU-20, M75 and MEM97, recombinant |Ťagments in various formats (scFv fragments monovalent and bivalent, i.e. diabody, and intrabody for intracellular expression) were constructed and for their heterologous expression, vectors allowing expression in E. coli (as cytoplasmic inclusions, periplasmic inclusions and in soluble form) and in Drosophila 32 cells (expression of glycosylated forms of scFv fragments into the medium) were used. In case of proteins expressed in irrsoluble form, especially scFv F|1.2.32, renaturation procedures to obtain active scFv fragments were developed and optimized. The efnect of the length of the linker -(GlyrSer).- (where x is I to 4) connecting the variable domains of the light and heavy chain on the formation of different multimeric forms of scFv rvas studied. For obtaining solell monomeric scFv fragment, the length of 20 amino acid residues tumsd out optimal. Fragnrents rvith a linker l5 residues long. formed a mixture of monomers, dimers and trimers. the proportion of rvhich rvas...en_US
dc.description.abstract6. ZÁvĚn Cílem této disertace bylo rozvinout v tuzemských podmínkách technologii příprav1, rekombinantních fragmentů protilátek a ověřit ce|ý postup na několika modelových monok|onálních protilátkách potenciálně využite|ných v diagnostice a terapii. Pro čtyři protilátky' mAb TU-20, M75, MEM97 a F||,2'32' byly zkonstnrovány rekombinantní fragmenty v ruzných formátech (scFv fragmenty monovalentní i bivalentní' tzv. diabody; intrabod)' pro intracelulámí expresi) a pro .iejich hetero|ogní expresi byly použity vektory umožňrrjícíexpresi vE. coli (ve ťormě c1,toplasmatíckých inkluzí' periplasmatických irrktuzí a v rozpustné formě) a v hmyzích 52 buňkách (exprese glykosylovaných ťorem scFv Ířagmentťr do nrédia). V případě exprese proteinťl v nerozpustne formě byly vyvinuty rel|aturačnípostupy pÍo získáni aktivních forem scFv fragmenhi. By| testován vliv délkylinkeru .(GlyaSer)". (kde x je I až4)spojujicího varíabilní doménu lehkého a těŽkého řetězce na vznik ruzných muItirnerních forem scFv. Jako optinrátní pro vznik pouze lrronon|emího scFv fragmentu se ukiizala déIka 20 arninokyse|in. ScFv s linkerem 15 arninokyse|in dlouhýn je srněsí mono-, di. a trimernich forern scFv, .;ejichž zastoupeni je ávislé na koncentraci scFv v roztoku (se vzrustajíci koncentrací vzrůstá množstvínásobných forem scFv, hlavně dimeru)....cs_CZ
dc.languageČeštinacs_CZ
dc.language.isocs_CZ
dc.publisherUniverzita Karlova, Přírodovědecká fakultacs_CZ
dc.titleRekombinantní fragmenty protilátekcs_CZ
dc.typedizertační prácecs_CZ
dcterms.created2008
dcterms.dateAccepted2008-05-29
dc.description.departmentDepartment of Biochemistryen_US
dc.description.departmentKatedra biochemiecs_CZ
dc.description.facultyFaculty of Scienceen_US
dc.description.facultyPřírodovědecká fakultacs_CZ
dc.identifier.repId112588
dc.title.translatedRecombinant Fragments of Antibodiesen_US
dc.contributor.refereePěknicová, Jana
dc.contributor.refereeHašek, Jindřich
dc.identifier.aleph000966534
thesis.degree.namePh.D.
thesis.degree.leveldoktorskécs_CZ
thesis.degree.discipline-cs_CZ
thesis.degree.discipline-en_US
thesis.degree.programBiochemiecs_CZ
thesis.degree.programBiochemistryen_US
uk.thesis.typedizertační prácecs_CZ
uk.taxonomy.organization-csPřírodovědecká fakulta::Katedra biochemiecs_CZ
uk.taxonomy.organization-enFaculty of Science::Department of Biochemistryen_US
uk.faculty-name.csPřírodovědecká fakultacs_CZ
uk.faculty-name.enFaculty of Scienceen_US
uk.faculty-abbr.csPřFcs_CZ
uk.degree-discipline.cs-cs_CZ
uk.degree-discipline.en-en_US
uk.degree-program.csBiochemiecs_CZ
uk.degree-program.enBiochemistryen_US
thesis.grade.csProspěl/acs_CZ
thesis.grade.enPassen_US
uk.abstract.cs6. ZÁvĚn Cílem této disertace bylo rozvinout v tuzemských podmínkách technologii příprav1, rekombinantních fragmentů protilátek a ověřit ce|ý postup na několika modelových monok|onálních protilátkách potenciálně využite|ných v diagnostice a terapii. Pro čtyři protilátky' mAb TU-20, M75, MEM97 a F||,2'32' byly zkonstnrovány rekombinantní fragmenty v ruzných formátech (scFv fragmenty monovalentní i bivalentní' tzv. diabody; intrabod)' pro intracelulámí expresi) a pro .iejich hetero|ogní expresi byly použity vektory umožňrrjícíexpresi vE. coli (ve ťormě c1,toplasmatíckých inkluzí' periplasmatických irrktuzí a v rozpustné formě) a v hmyzích 52 buňkách (exprese glykosylovaných ťorem scFv Ířagmentťr do nrédia). V případě exprese proteinťl v nerozpustne formě byly vyvinuty rel|aturačnípostupy pÍo získáni aktivních forem scFv fragmenhi. By| testován vliv délkylinkeru .(GlyaSer)". (kde x je I až4)spojujicího varíabilní doménu lehkého a těŽkého řetězce na vznik ruzných muItirnerních forem scFv. Jako optinrátní pro vznik pouze lrronon|emího scFv fragmentu se ukiizala déIka 20 arninokyse|in. ScFv s linkerem 15 arninokyse|in dlouhýn je srněsí mono-, di. a trimernich forern scFv, .;ejichž zastoupeni je ávislé na koncentraci scFv v roztoku (se vzrustajíci koncentrací vzrůstá množstvínásobných forem scFv, hlavně dimeru)....cs_CZ
uk.abstract.en6. CoNct usloN The aim of the thesis was to establish, in the national conditions, technology of preparation of antibody reconrbinant fragrnents and to verífo the cornplete procedure using several model monoclonal antibodies with a potential diagnostic and therapeutic use. For tfuee antibodies' mAb TU-20, M75 and MEM97, recombinant |Ťagments in various formats (scFv fragments monovalent and bivalent, i.e. diabody, and intrabody for intracellular expression) were constructed and for their heterologous expression, vectors allowing expression in E. coli (as cytoplasmic inclusions, periplasmic inclusions and in soluble form) and in Drosophila 32 cells (expression of glycosylated forms of scFv fragments into the medium) were used. In case of proteins expressed in irrsoluble form, especially scFv F|1.2.32, renaturation procedures to obtain active scFv fragments were developed and optimized. The efnect of the length of the linker -(GlyrSer).- (where x is I to 4) connecting the variable domains of the light and heavy chain on the formation of different multimeric forms of scFv rvas studied. For obtaining solell monomeric scFv fragment, the length of 20 amino acid residues tumsd out optimal. Fragnrents rvith a linker l5 residues long. formed a mixture of monomers, dimers and trimers. the proportion of rvhich rvas...en_US
uk.file-availabilityV
uk.publication.placePrahacs_CZ
uk.grantorUniverzita Karlova, Přírodovědecká fakulta, Katedra biochemiecs_CZ
thesis.grade.codeP
dc.identifier.lisID990009665340106986


Soubory tohoto záznamu

Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail

Tento záznam se objevuje v následujících sbírkách

Zobrazit minimální záznam


© 2017 Univerzita Karlova, Ústřední knihovna, Ovocný trh 560/5, 116 36 Praha 1; email: admin-repozitar [at] cuni.cz

Za dodržení všech ustanovení autorského zákona jsou zodpovědné jednotlivé složky Univerzity Karlovy. / Each constituent part of Charles University is responsible for adherence to all provisions of the copyright law.

Upozornění / Notice: Získané informace nemohou být použity k výdělečným účelům nebo vydávány za studijní, vědeckou nebo jinou tvůrčí činnost jiné osoby než autora. / Any retrieved information shall not be used for any commercial purposes or claimed as results of studying, scientific or any other creative activities of any person other than the author.

DSpace software copyright © 2002-2015  DuraSpace
Theme by 
@mire NV