Diagnostika invazivního meningokokového onemocnění metodou PCR

Abstract

Úvod: Invazivní meningokokové onemocnění patří stále mezi život ohrožující stavy. Rychlá diagnostika je důležitá pro včasné zahájení adekvátní léčby. peR je přímá, rychlá a bezkultivační metoda detekující meningokokovou DNA. Naše studie je zaměřena na zhodnocení významu peR pro potvrzení meningokokové etiologie, srovnání peR s ostatními diagnostickými metodami, stanovení dynamiky peR a LA pozitivity v různých klinických materiálech, hodnocení vlivu nasazené antibiotické terapie na výsledek diagnostických metod a hodnocení anamnestických a klinických údajů pacientů. Metodv: Vyšetřeny byly vzorky mozkomíšního moku a séra odebrané během prvního týdne hospitalizace od pacientů s laboratorně potvrzeným IMO. Bakteriální DNA byla izolována Qiagen kitem a byla použita jednokroková a dvoukroková (seminested) peR. peR produkty byly detekovány na 2% gelové elektroforéze. Současně bylo provedeno kultivační vyšetření a latexová aglutinace. Výsledky: peR pozitivita v likvoru dosáhla 92 % a v séru 46 %, LA byla pozitivní u 47 % vzorků likvoru, 42 % vzorků krve a 24 % vzorků moče. Kultivace likvoru byla pozitivní jen v 35 % a hemokultivace v 39 %. Poslední pozitivní výsledek peR byl detekován 7. den v likvoru a 5. den v séru, čož ukazuje na rychlejší eliminaci patogena ze séra. Trvání pozitivity LA v likvoru a séru (2. a...

lntroduction: lnvasive meningococcal disease continues to be a life-threatening condition. Rapid diagnosis is important for the administration of appropriate treatment. Our study focuses on evaluation of importance of PCR method for diagnosis of meningococcal disease. We describe in detail the dynamics of PCR method and its relationship to other diagnostic methods (LA, culture) and to the course of the disease. We also evaluated the influence of previously appl ied antibiotics therapy to results ofthese diagnostic methods. Methods: We have investigated cerebrospinal fluid and serum samples collected during the 1 sl week of hospitalization from patients hospitalized at the department of infectious diseases with laboratory confirmed invasi ve meningococcal disease. Bacterial DNA was isolated from biological material by Qiagen kit and one-step and seminested PCR method was used. PCR products were detected on the 2% gel electrophoresis. In parallel, we performed culture and LA methods. Results: The PCR positivity in cerebrospinal fluid and serum achieved 92 % and 46 %, respectively, LA positivity in cerebrospinal fluid, serum and urine achieved 47 %, 42 % and 24 %, respectively. Culture of CSF and blood was positive only in 35 % and 39 %, respectively. The latest PCR positivity was detected at Day 7 in...