Molekulární mechanismy buněčné nepermisivity vůči viru Rousova sarkomu

Abstract

Většina virů dokáže infikovat pouze omezené spektrum organizmů a jen v některých z nich je možná jejich účinná replikace. Takové organizmy označujeme jako permisivní pro daný virus. Molekulární podstata nepermisivity a mechanizmy, kterými ji viry dokážou překonat, zatím nejsou dostatečně prostudovány. Tato práce zkoumá molekulární příčiny buněčné nepermisivity vůči viru Rousova sarkomu, který je modelovým retrovirem. Výzkum je prováděn na kachních buňkách, které jsou vůči viru Rou- sova sarkomu podskupiny C semipermisivní, což znamená, že virus do nich dokáže vstoupit, ale nevytváří dostatečné množství infekčního virového potomstva. Výsledky této práce ukazují dva bloky v replikačním cyklu viru v kachních buňkách. První je na úrovni rozpoznání receptoru, které zřejmě není optimální. Druhý blok se nachází v pozdní fázi replikačního cyklu při syntéze virových proteinů. Předloha pro obalový glykoprotein, env mRNA, nevzniká kvůli pozměněným sestřihovým poměrům v dostatečném množství a produkované viri- ony z kachních buněk mají sníženou infektivitu. Tento blok může být částečně překonán bu- něčnou fúzí s permisivními kuřecími buňkami, je tedy recesivní a nejedná se zde o sensu stricto spe- cifické restrikční faktory. Dále byl testován vliv mutací získaných při adaptaci viru na kachní buňky. Oproti...

Most viruses can infect only a reduced range of organisms and an effective replication is possible only in selected hosts. These hosts are called permissive for the virus. Molecular principles of a nonpermissiveness and viral mechanisms of overcoming replication obstacles are still not clearly elucidated. This thesis discusses the molecular causes of the cellular nonpermissiveness against a model retrovirus - Rous sarcoma virus. The research is conducted on duck cells which are semipermis- sive to the subgroup C of Rous sarcoma virus. The virus can enter those cells, but it is not able to produce enough infectious viral progeny. Two blocks of the viral replication cycle in the duck cells are described in the thesis. The first one is the probably not optimal cellular receptor recognition. The second one is in the late phase of the replication cycle when the viral proteins are synthesized. The amount of the envelope glyco- protein coding mRNA is reduced due to the altered splicing ratios, and the virions produced from the duck cells are less infectious. This block is recessive and can be partially omitted by cell fusions with permissive chicken cells; therefore, the block is not caused by specific restriction fac- tors in sensu stricto. Additionally, the influence of mutations in duck adapted Rous...