Show simple item record

Monitoring of selected steroid hormones by HPLC-MS/MS and studying their impact on mouse sperm in vitro.
dc.contributor.advisorHortová, Kateřina
dc.creatorBosáková, Tereza
dc.date.accessioned2017-06-26T09:47:35Z
dc.date.available2017-06-26T09:47:35Z
dc.date.issued2017
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/20.500.11956/85516
dc.description.abstractTato diplomová práce byla zaměřena na vývoj nové metody využívající vysokoúčinnou kapalinovou chromatografii s tandemovou hmotnostní detekcí (HPLC-MS/MS) pro kvantifikaci vybraných steroidních hormonů, a to 17α-ethynylestradiolu (EE2) a progesteronu (PRG), v M2 fertilizačním médiu. Toto médium je používané při kapacitaci spermií in vitro, což je proces, kdy dochází ke komplexním molekulárně-biochemickým změnám ve spermii, na jejichž základě spermie získávají schopnost oplodnění. Fyziologický průběh tohoto procesu je tudíž zásadní pro získání fertilizační schopnosti samčích gamet. Optimalizované HPLC-MS/MS podmínky (kolona Kinetex EVO C18, mobilní fáze 50/50 (v/v) ACN/H2O, s 0,1% obsahem mravenčí kyseliny v obou složkách, průtok mobilní fáze 0,3 ml/min, nástřik 7,5 µl) byly aplikované pro sledování koncentračních změn jednotlivých analytů během časově závislé kapacitace myších spermií. Testované koncentrace pro EE2 byly 200, 20 a 2 µg/l a pro PRG pouze 200 µg/l. Bylo zjištěno, že nejprve dochází k poklesu koncentrace volného, nevázaného EE2 (minimum okolo 60. min kapacitace) a poté k jejímu opětovnému nárůstu. Tento trend vykazovaly všechny testované koncentrace. Koncentrace (200 µg/l) volného, nevázaného PRG klesala po celou dobu kapacitace. Závislosti koncentrace volného, nevázaného hormonu na...cs_CZ
dc.description.abstractThe present project aims were development of a new sensitive separation method using high performance liquid chromatography with tandem mass spectrometric detection, which enables quantification of selected steroid hormones, namely 17α-ethynylestradiol (EE2) and progesterone (PRG) in M2 fertilizing medium. M2 medium is used during sperm capacitation in vitro, which is the physiological process of complex molecular and biochemical changes, essential for obtaining fertilizing ability of male gametes. Optimized separation and detection conditions (column Kinetex EVO C18 with mobile phase consisted of 50/50 (v/v) acetonitrile/water with 0.1% formic acid in both components) were applied on monitoring of concentration changes of each hormone during time dependent sperm capacitation. The concentration tested for EE2 were 200, 20 and 2 µg/l and for PRG 200 µg/l only. It was found that concentration of free, unbounded EE2 firstly decreases, reaches the minimum in about 60 min of capacitation and then increases again. This trend was observed for all three tested concentrations. Concentration (200 µg/l) of free unbounded PRG decreased during whole capacitation. The following kinetic analysis will be based on the concentration dependences of the free unbound hormones on the capacitation time. The results of...en_US
dc.languageČeštinacs_CZ
dc.language.isocs_CZ
dc.publisherUniverzita Karlova, Přírodovědecká fakultacs_CZ
dc.titleMonitorování vybraných steroidních hormonů metodou HPLC-MS/MS a studium jejich vlivu na myší spermie in vitro.cs_CZ
dc.typediplomová prácecs_CZ
dcterms.created2017
dcterms.dateAccepted2017-06-05
dc.description.departmentDepartment of Analytical Chemistryen_US
dc.description.departmentKatedra analytické chemiecs_CZ
dc.description.facultyPřírodovědecká fakultacs_CZ
dc.description.facultyFaculty of Scienceen_US
dc.identifier.repId169614
dc.title.translatedMonitoring of selected steroid hormones by HPLC-MS/MS and studying their impact on mouse sperm in vitro.en_US
dc.contributor.refereePacáková, Věra
thesis.degree.nameMgr.
thesis.degree.levelnavazující magisterskécs_CZ
thesis.degree.disciplineKlinická a toxikologická analýzacs_CZ
thesis.degree.disciplineClinical and Toxicological Analysisen_US
thesis.degree.programClinical and Toxicological Analysisen_US
thesis.degree.programKlinická a toxikologická analýzacs_CZ
uk.faculty-name.csPřírodovědecká fakultacs_CZ
uk.faculty-name.enFaculty of Scienceen_US
uk.faculty-abbr.csPřFcs_CZ
uk.degree-discipline.csKlinická a toxikologická analýzacs_CZ
uk.degree-discipline.enClinical and Toxicological Analysisen_US
uk.degree-program.csKlinická a toxikologická analýzacs_CZ
uk.degree-program.enClinical and Toxicological Analysisen_US
thesis.grade.csVýborněcs_CZ
thesis.grade.enExcellenten_US
uk.abstract.csTato diplomová práce byla zaměřena na vývoj nové metody využívající vysokoúčinnou kapalinovou chromatografii s tandemovou hmotnostní detekcí (HPLC-MS/MS) pro kvantifikaci vybraných steroidních hormonů, a to 17α-ethynylestradiolu (EE2) a progesteronu (PRG), v M2 fertilizačním médiu. Toto médium je používané při kapacitaci spermií in vitro, což je proces, kdy dochází ke komplexním molekulárně-biochemickým změnám ve spermii, na jejichž základě spermie získávají schopnost oplodnění. Fyziologický průběh tohoto procesu je tudíž zásadní pro získání fertilizační schopnosti samčích gamet. Optimalizované HPLC-MS/MS podmínky (kolona Kinetex EVO C18, mobilní fáze 50/50 (v/v) ACN/H2O, s 0,1% obsahem mravenčí kyseliny v obou složkách, průtok mobilní fáze 0,3 ml/min, nástřik 7,5 µl) byly aplikované pro sledování koncentračních změn jednotlivých analytů během časově závislé kapacitace myších spermií. Testované koncentrace pro EE2 byly 200, 20 a 2 µg/l a pro PRG pouze 200 µg/l. Bylo zjištěno, že nejprve dochází k poklesu koncentrace volného, nevázaného EE2 (minimum okolo 60. min kapacitace) a poté k jejímu opětovnému nárůstu. Tento trend vykazovaly všechny testované koncentrace. Koncentrace (200 µg/l) volného, nevázaného PRG klesala po celou dobu kapacitace. Závislosti koncentrace volného, nevázaného hormonu na...cs_CZ
uk.abstract.enThe present project aims were development of a new sensitive separation method using high performance liquid chromatography with tandem mass spectrometric detection, which enables quantification of selected steroid hormones, namely 17α-ethynylestradiol (EE2) and progesterone (PRG) in M2 fertilizing medium. M2 medium is used during sperm capacitation in vitro, which is the physiological process of complex molecular and biochemical changes, essential for obtaining fertilizing ability of male gametes. Optimized separation and detection conditions (column Kinetex EVO C18 with mobile phase consisted of 50/50 (v/v) acetonitrile/water with 0.1% formic acid in both components) were applied on monitoring of concentration changes of each hormone during time dependent sperm capacitation. The concentration tested for EE2 were 200, 20 and 2 µg/l and for PRG 200 µg/l only. It was found that concentration of free, unbounded EE2 firstly decreases, reaches the minimum in about 60 min of capacitation and then increases again. This trend was observed for all three tested concentrations. Concentration (200 µg/l) of free unbounded PRG decreased during whole capacitation. The following kinetic analysis will be based on the concentration dependences of the free unbound hormones on the capacitation time. The results of...en_US
uk.file-availabilityV
uk.publication.placePrahacs_CZ
uk.grantorUniverzita Karlova, Přírodovědecká fakulta, Katedra analytické chemiecs_CZ


Files in this item

Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail

This item appears in the following Collection(s)

Show simple item record


© 2017 Univerzita Karlova, Ústřední knihovna, Ovocný trh 560/5, 116 36 Praha 1; email: admin-repozitar [at] cuni.cz

Za dodržení všech ustanovení autorského zákona jsou zodpovědné jednotlivé složky Univerzity Karlovy. / Each constituent part of Charles University is responsible for adherence to all provisions of the copyright law.

Upozornění / Notice: Získané informace nemohou být použity k výdělečným účelům nebo vydávány za studijní, vědeckou nebo jinou tvůrčí činnost jiné osoby než autora. / Any retrieved information shall not be used for any commercial purposes or claimed as results of studying, scientific or any other creative activities of any person other than the author.

DSpace software copyright © 2002-2015  DuraSpace
Theme by 
@mire NV