Regulace transkripce faktory sigma u Bacillus subtilis
Transcription regulation by sigma factors in Bacillus subtils
diplomová práce (OBHÁJENO)
Zobrazit/ otevřít
Trvalý odkaz
http://hdl.handle.net/20.500.11956/81761Identifikátory
SIS: 157863
Kolekce
- Kvalifikační práce [19109]
Autor
Vedoucí práce
Oponent práce
Seydlová, Gabriela
Fakulta / součást
Přírodovědecká fakulta
Obor
Genetika, molekulární biologie a virologie
Katedra / ústav / klinika
Katedra genetiky a mikrobiologie
Datum obhajoby
9. 6. 2016
Nakladatel
Univerzita Karlova, Přírodovědecká fakultaJazyk
Čeština
Známka
Výborně
Klíčová slova (česky)
RNA polymeráza, SigF, SigG, SigK, SigI, Bacillus, transkripce, regulaceKlíčová slova (anglicky)
RNA polymerase, SigF, SigG, SigK, SigI, Bacillus, transcription, regulationPro regulaci genové exprese u bakterií je klíčovým enzymem RNA polymeráza (RNAP). RNAP je více-podjednotkový enzym, který pro rozpoznání DNA využívá podjednotky (faktory) σ. Regulace RNAP s hlavním faktorem σ již byla důkladně studována, oproti tomu regulační mechanismy pro RNAP s alternativními faktory σ dosud nebyly systematicky zkoumány. Tato práce se zabývá převážně modelovým organizmem Bacillus subtilis a jeho alternativními faktory σF , σG , σI a σK . Byla studována transkripční iniciace s těmito faktory z hlediska schopnosti transkribovat z různých promotorů, požadavku RNAP na koncentraci iniciačního nukleosidtrifosfátu (iNTP) a interakce RNAP s vybranými proteiny. Pro faktor σF zde byl pomocí transkripcí in vitro objeven promotor regulovaný koncentrací iNTP, u faktoru σI naopak tento regulační mechanismus nalezen nebyl. V případě σG závislé transkripce se nepodařilo regulaci pomocí koncentrace iNTP otestovat, nicméně byl potvrzen v literatuře popsaný pozitivní vliv proteinu YlyA na transkripční aktivitu RNAP obsahující faktor σG ; tento vliv byl nově objeven také pro RNAP s faktorem σF . Dále byla zkoumána možná funkční interakce proteinu HelD s faktorem σK , která však nebyla potvrzena. Konečně pak tato práce přispěla k objasnění vlivu umělých modifikací nukleových bází na transkripci.
RNA polymerase (RNAP) is a key enzyme in regulation of bacterial gene expression. RNAP is multi-subunit enzyme and its σ subunits (factors) are used for DNA recognition. Regulation of RNAP complexed with the major σ factor has been thoroughly studied; in contrast, mechanisms of regulation of RNAP containing alternative σ factors are much less understood. This thesis is focused mainly on the model organism Bacillus subtilis and its alternative σ factors σF , σG , σI a σK . We studied the ability of RNAP in complex with these factors to recognize promoter sequences, to initiate transcription in dependence on the concentration of the initiating nucleoside triphosphate (iNTP), and to interact with selected proteins. For σF , a promoter regulated by the concentration of iNTP was discovered; for σI , to the contrary, this mechanism was not observed. In the case of σG -dependent transcription we were not able to examine regulation by the concentration of iNTP. Nevertheless, stimulation of σG -dependent transcription by a protein called YlyA, previously described in the literature, was confirmed. This stimulation was newly identified also for σF -dependent transcription. Further, we examined possible functional interaction between HelD and σK , but this link was not confirmed. Finally, this thesis...