Vývoj a validace metody pro hodnocení tablet agomelatinu pomocí UHPSFC a UHPLC

Abstract

Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Analytické chemie Kandidát: Kateřina Plachká Školitel: doc. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj a validace metody pro hodnocení tablet agomelatinu pomocí UHPSFC a UHPLC Agomelatin je jedním z nejnovějších antidepresiv. Vzhledem k odlišnému mechanismu účinku nabízí nový přístup k léčbě depresivních poruch. Byly vyvinuty dvě chromatografické metody pro stanovení agomelatinu a jeho nečistot. Separace na UHPSFC systému proběhly za použití stacionární fáze BEH 2-EP a gradientové eluce za využití CO2 a MeOH obsahujícího 20mM mravenčan amonný a 5 % vody. Gradient se zvyšoval od 5 do 30 % organického modifikátoru během 3 minut. UHPLC separace proběhly na stacionární fázi BEH Shield RP 18. Jako mobilní fáze byla využita směs acetonitrilu a metanolu v poměru 1:1 a 10mM pufr octanu amonného pH 9,5. Obě vyvinuté metody byly náležitě zvalidovány dle doporučených postupů ICH v parametrech linearity, citlivosti (LOD, LOQ), přesnosti a správnosti. UHPSFC metoda byla lineární v rozmezí 0,25-70 μg/ml pro všechny analyty se správností ≥ 97,4 % a ≥ 100, 2 % a přesností RSD ≤ 2,4 a ≤ 0,8 pro nečistoty a API. UHPLC metoda byla lineární v rozmezí 0,1-10 μg/ml pro všechny analyty s výjimkou tří nečistot, jejichž lineární...

Charles University in Prague, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical Chemistry Candidate: Kateřina Plachká Supervisor: doc. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Title of Diploma Thesis: Development and validation of methods for the determination of agomelatine using UHPSFC and UHPLC Agomelatine is one of the newest antidepressants. Due to a different mechanism of action it offers a completely new approach in the treatment of depressive disorders. Two chromatographic methods for determination of agomelatine and its impurities were developed. The separations on UHPSFC system were accomplished using stationary phase based on BEH 2-EP and gradient elution using CO2 and MeOH containing 20mM ammonium formate and 5 % of water. The gradient was run from 5 - 30 % of organic modifier in 3 min. The UHPLC separations were performed on stationary phase BEH Shield RP18. The mixture of acetonitrile and methanol in ratio 1:1 and 10mM ammonium acetate buffer pH 9.5 were used as mobile phase. Both developed methods were properly validated in terms of linearity, sensitivity (LOD, LOQ), accuracy and precision according to ICH guidelines. The UHPSFC method was linear in the range 0.25-70 μg/ml for all analytes with method accuracy ≥ 97.4 % and ≥ 100.2 % and method precision RSD ≤ 2.4 and ≤ 0.8 for...