Show simple item record

Preparation and characterization of synthetic mRNA coding for pancreatic transcription factors
dc.contributor.advisorHodek, Petr
dc.creatorLoukotová, Šárka
dc.date.accessioned2021-03-24T21:48:24Z
dc.date.available2021-03-24T21:48:24Z
dc.date.issued2015
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/20.500.11956/74516
dc.description.abstractDiabetes mellitus 1. typu je závažné autoimunitní onemocnění, při kterém v pankreatu dochází k zániku β-buněk produkujících insulin. Pacienti postižené tímto onemocněním jsou odkázáni na celoživotní zevní podávání insulinu. V současné době je jedinou dostupnou léčebnou metodou buď transplantace celého orgánu pankreatu, nebo izolovaných Langerhansových ostrůvků. Kvůli nedostatku vhodné tkáně k transplantaci a náročné léčbě diabetu probíhá intenzivní výzkum nových alternativních zdrojů buněk produkujících insulin. Jednou z metod přípravy buněk produkujících insulin je tzv. transdiferenciace pankreatických exokrinních buněk pomocí specifických transkripčních faktorů. V této práci byla k transdiferenciaci exokrinní buněčné linie AR42J použita in vitro synteticky připravená mRNA kódující transkripční faktory Pdx1, Ngn3 a MafA. Primární sekvence mRNA byla optimalizována pro přípravu velmi stabilní mRNA s vysokou mírou translace. Hlavními stabilizačními prvky mRNA byly 3' a 5' nepřekládaná oblast genu pro β-globinu, jehož mRNA vykazuje životnost až 24 hod. Na základě transfekce do buněk AR42J a následné imunofluorescenční detekce byla ověřena správná funkce synteticky připravené mRNA. Synteticky připravené mRNA pro transkripční faktory Pdx1, Ngn3 a MafA byly následně použity k transdiferenciaci...cs_CZ
dc.description.abstractDiabetes mellitus type I is severe autoimmune disease which is caused by destruction of insulin-producing β-cells in pancreas. Diabetic patients are dependent on external usage of insulin during their whole life. Nowadays the only treatment of diabetes type I is transplantation of entire pancreas or isolated Langerhans islets. Due to the fact that this kind of treatment is very demanding and limited availability of suitable donors, the researchers are intensively working on development of new alternative ways how to produce the insulin-producing cells. One of the possible approaches on producing insulin-positive cells is transdifferentiation of pancreatic exocrine cells via transcription factors. In this diploma thesis, the transdifferentiation of exocrine cells AR42J was carried out with in vitro synthesized mRNA encoding transcription factors Pdx1, Ngn3 and MafA. The primary mRNA structure was optimized in order to prepare highly stable mRNA which is correctly translated into the protein. The main stabilizing elements in mRNA structure include 3' and 5' untranslated region derived from highly stable β-globin mRNA. In order to verify the function of synthetic mRNA the immunofluorescence staining of transcription factors has been investigated. Synthetic mRNAs encoding transcription factors Pdx1,...en_US
dc.languageČeštinacs_CZ
dc.language.isocs_CZ
dc.publisherUniverzita Karlova, Přírodovědecká fakultacs_CZ
dc.subjectpancreatic cellsen_US
dc.subjectprotein expressionen_US
dc.subjecttransfectionen_US
dc.subjectcell cultureen_US
dc.subjectbuňky pankreatucs_CZ
dc.subjectexprese proteinůcs_CZ
dc.subjecttransfekcecs_CZ
dc.subjectbuněčné kulturycs_CZ
dc.titlePříprava a charakterizace syntetické mRNA kódující pankreatické transkripční faktorycs_CZ
dc.typediplomová prácecs_CZ
dcterms.created2015
dcterms.dateAccepted2015-09-07
dc.description.departmentDepartment of Biochemistryen_US
dc.description.departmentKatedra biochemiecs_CZ
dc.description.facultyFaculty of Scienceen_US
dc.description.facultyPřírodovědecká fakultacs_CZ
dc.identifier.repId141155
dc.title.translatedPreparation and characterization of synthetic mRNA coding for pancreatic transcription factorsen_US
dc.contributor.refereeJirák, Daniel
dc.identifier.aleph002027642
thesis.degree.nameMgr.
thesis.degree.levelnavazující magisterskécs_CZ
thesis.degree.disciplineBiochemiecs_CZ
thesis.degree.disciplineBiochemistryen_US
thesis.degree.programBiochemistryen_US
thesis.degree.programBiochemiecs_CZ
uk.thesis.typediplomová prácecs_CZ
uk.taxonomy.organization-csPřírodovědecká fakulta::Katedra biochemiecs_CZ
uk.taxonomy.organization-enFaculty of Science::Department of Biochemistryen_US
uk.faculty-name.csPřírodovědecká fakultacs_CZ
uk.faculty-name.enFaculty of Scienceen_US
uk.faculty-abbr.csPřFcs_CZ
uk.degree-discipline.csBiochemiecs_CZ
uk.degree-discipline.enBiochemistryen_US
uk.degree-program.csBiochemiecs_CZ
uk.degree-program.enBiochemistryen_US
thesis.grade.csVýborněcs_CZ
thesis.grade.enExcellenten_US
uk.abstract.csDiabetes mellitus 1. typu je závažné autoimunitní onemocnění, při kterém v pankreatu dochází k zániku β-buněk produkujících insulin. Pacienti postižené tímto onemocněním jsou odkázáni na celoživotní zevní podávání insulinu. V současné době je jedinou dostupnou léčebnou metodou buď transplantace celého orgánu pankreatu, nebo izolovaných Langerhansových ostrůvků. Kvůli nedostatku vhodné tkáně k transplantaci a náročné léčbě diabetu probíhá intenzivní výzkum nových alternativních zdrojů buněk produkujících insulin. Jednou z metod přípravy buněk produkujících insulin je tzv. transdiferenciace pankreatických exokrinních buněk pomocí specifických transkripčních faktorů. V této práci byla k transdiferenciaci exokrinní buněčné linie AR42J použita in vitro synteticky připravená mRNA kódující transkripční faktory Pdx1, Ngn3 a MafA. Primární sekvence mRNA byla optimalizována pro přípravu velmi stabilní mRNA s vysokou mírou translace. Hlavními stabilizačními prvky mRNA byly 3' a 5' nepřekládaná oblast genu pro β-globinu, jehož mRNA vykazuje životnost až 24 hod. Na základě transfekce do buněk AR42J a následné imunofluorescenční detekce byla ověřena správná funkce synteticky připravené mRNA. Synteticky připravené mRNA pro transkripční faktory Pdx1, Ngn3 a MafA byly následně použity k transdiferenciaci...cs_CZ
uk.abstract.enDiabetes mellitus type I is severe autoimmune disease which is caused by destruction of insulin-producing β-cells in pancreas. Diabetic patients are dependent on external usage of insulin during their whole life. Nowadays the only treatment of diabetes type I is transplantation of entire pancreas or isolated Langerhans islets. Due to the fact that this kind of treatment is very demanding and limited availability of suitable donors, the researchers are intensively working on development of new alternative ways how to produce the insulin-producing cells. One of the possible approaches on producing insulin-positive cells is transdifferentiation of pancreatic exocrine cells via transcription factors. In this diploma thesis, the transdifferentiation of exocrine cells AR42J was carried out with in vitro synthesized mRNA encoding transcription factors Pdx1, Ngn3 and MafA. The primary mRNA structure was optimized in order to prepare highly stable mRNA which is correctly translated into the protein. The main stabilizing elements in mRNA structure include 3' and 5' untranslated region derived from highly stable β-globin mRNA. In order to verify the function of synthetic mRNA the immunofluorescence staining of transcription factors has been investigated. Synthetic mRNAs encoding transcription factors Pdx1,...en_US
uk.file-availabilityV
uk.grantorUniverzita Karlova, Přírodovědecká fakulta, Katedra biochemiecs_CZ
thesis.grade.code1
dc.contributor.consultantKoblas, Tomáš
uk.publication-placePrahacs_CZ
uk.thesis.defenceStatusO
dc.identifier.lisID990020276420106986


Files in this item

Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail

This item appears in the following Collection(s)

Show simple item record


© 2017 Univerzita Karlova, Ústřední knihovna, Ovocný trh 560/5, 116 36 Praha 1; email: admin-repozitar [at] cuni.cz

Za dodržení všech ustanovení autorského zákona jsou zodpovědné jednotlivé složky Univerzity Karlovy. / Each constituent part of Charles University is responsible for adherence to all provisions of the copyright law.

Upozornění / Notice: Získané informace nemohou být použity k výdělečným účelům nebo vydávány za studijní, vědeckou nebo jinou tvůrčí činnost jiné osoby než autora. / Any retrieved information shall not be used for any commercial purposes or claimed as results of studying, scientific or any other creative activities of any person other than the author.

DSpace software copyright © 2002-2015  DuraSpace
Theme by 
@mire NV