Zjednodušení HPLC analýzy terbinafinu ve vzorcích na bázi biodegradabilních polyesterů

Abstract

Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biofyziky a fyzikální chemie Řešitel: Andrea Malovaná Školitel: Ing. Martin Drastík, Ph.D. Diplomová práce: Zjednodušení HPLC analýzy terbinafinu ve vzorcích na bázi biodegradabilních polyesterů Byla optimalizována a validována HPLC metoda pro stanovení terbinafinu ve vzorcích tvořených kopolymery kyseliny mléčné a glykolové. Vývoj metody spočíval v nalezení vhodných chromatografických podmínek pro separaci terbinafinu. Byla použita core-shell kolona Ascentis Express ES-CN, 15 cm × 4,6 mm; 2,7 μm. Jako mobilní fáze byla zvolena směs citrát fosfátového pufru o pH 4 a acetonitrilu v poměru 40:60 (v/v). Celá chromatografická analýza probíhala při průtoku mobilní fáze 1,4 ml/min a teplotě 30 řC. Dávkovaný objem vzorku terbinafinu byl 5 µl. Optimalizovaná metoda využívala UV detekci při vlnové délce 226 nm. Retenční čas terbinafinu byl 3,3 minuty. Celkový čas analýzy byl 4 minuty. Validací metody se potvrdila její spolehlivost při opakovaném použití. Byla testována: účinnost kolony, faktor symetrie, LOD, LOQ, linearita, opakovatelnost a robustnost. Klíčová slova: terbinafin, HPLC, core-shell kolona, PLGA

Charles University in Prague Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biophysics and Physical Chemistry Candidate: Andrea Malovaná Supervisor: Ing. Martin Drastík, Ph. D. Diploma thesis: Simplification of terbinafine HPLC analysis of samples based on biodegradable polyesters A HPLC method for determination of terbinafine in samples consisting of copolymers of lactic and glycolic acid was optimized and validated. The development of the method was based on the finding of suitable chromatographic conditions for separation of terbinafine. The separation was performed on the Ascentis Express ES-CN, 15 cm × 4.6 mm; 2.7 μm core- shell column. The mixture of the citrate phosphate buffer pH 4 and acetonitrile in ratio 40:60 (v/v) was chosen as the mobile phase. The mobile phase flow rate was set to 1.4 ml/min and the temperature to 30 řC. The injection volume of samples containing terbinafine was 5 µl. The UV detection at 226 nm was employed. The retention time of terbinafine was 3.3 min. The whole analysis was completed within 4 min. The method was validated, following parameters were tested: column efficiency, factor of symmetry, LOD, LOQ, linearity, repeatability and robustness. Keywords: terbinafine, HPLC, core-shell column, PLGA