Show simple item record

Preparation of lentiviral expression vector with reporter gene
dc.contributor.advisorVaněk, Ondřej
dc.creatorSkořepa, Ondřej
dc.date.accessioned2017-05-27T20:32:34Z
dc.date.available2017-05-27T20:32:34Z
dc.date.issued2014
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/20.500.11956/72825
dc.description.abstractVedle rekombinantní exprese proteinů v prokaryotických buněčných liniích (E. coli) se dostávají do popředí systémy, které rychle, spolehlivě a stabilně produkují rekombinantní proteiny v lidských buněčných liniích. Ty zaručují vhodnou terciární strukturu a posttranslační modifikace požadovaných produktů. Jednou z možností, jak docílit produkce rekombinantních proteinů v lidských buněčných liniích, je použití lentivirových vektorů. Tato práce popisuje přípravu lentivirového vektoru (plazmidu) Daedalus, který obsahuje konstrukt pro rekombinantní expresi sekretované alkalické fosfatázy. K přípravě požadovaného plazmidu byly použity metody založené na inzerci genu sekretované alkalické fosfatázy pomocí restrikčních endonukleáz a metody, založené na amplifikaci polymerázovou řetězovou reakcí, klonování bez restrikčního štěpení, přenosová polymerázová reakce a Gibsnova reakce.cs_CZ
dc.description.abstractBesides recombinant protein expression in prokaryotic cell lines (E. coli), systems, that could quickly, reliably and stably produce recombinant proteins in human cell lines, come to the fore. These cell lines assure proper tertiary structure and post-translational modification of the desired products. One of the ways to achieve production of recombinant proteins in human cell lines is the use of lentiviral vectors. This thesis describes the preparation of the lentiviral vector (plasmid) Daedalus, which contains a construct for recombinant expression of secreted alkaline phosphatase. For the preparation of the desired plasmid methods based on insertion of the secreted alkaline phosphatase gene using the restriction endonucleases and methods based on amplification by polymerase chain reaction (restriction-free cloning, transfer polymerase chain reaction and Gibson assembly) were used.en_US
dc.languageČeštinacs_CZ
dc.language.isocs_CZ
dc.publisherUniverzita Karlova, Přírodovědecká fakultacs_CZ
dc.subjectlentiviruscs_CZ
dc.subjectDaedaluscs_CZ
dc.subjectSEAPcs_CZ
dc.subjectklonování DNAcs_CZ
dc.subjectplazmidcs_CZ
dc.subjectlentivirusen_US
dc.subjectDaedalusen_US
dc.subjectSEAPen_US
dc.subjectDNA cloningen_US
dc.subjectplasmiden_US
dc.titlePříprava lentivirového expresního vektoru s reportérovým genemcs_CZ
dc.typebakalářská prácecs_CZ
dcterms.created2014
dcterms.dateAccepted2014-09-15
dc.description.departmentDepartment of Biochemistryen_US
dc.description.departmentKatedra biochemiecs_CZ
dc.description.facultyPřírodovědecká fakultacs_CZ
dc.description.facultyFaculty of Scienceen_US
dc.identifier.repId141144
dc.title.translatedPreparation of lentiviral expression vector with reporter geneen_US
dc.contributor.refereeMilichovský, Jan
dc.identifier.aleph001862472
thesis.degree.nameBc.
thesis.degree.levelbakalářskécs_CZ
thesis.degree.disciplineKlinická a toxikologická analýzacs_CZ
thesis.degree.disciplineClinical and Toxicological Analysisen_US
thesis.degree.programKlinická a toxikologická analýzacs_CZ
thesis.degree.programClinical and Toxicological Analysisen_US
uk.thesis.typebakalářská prácecs_CZ
uk.taxonomy.organization-csPřírodovědecká fakulta::Katedra biochemiecs_CZ
uk.taxonomy.organization-enFaculty of Science::Department of Biochemistryen_US
uk.faculty-name.csPřírodovědecká fakultacs_CZ
uk.faculty-name.enFaculty of Scienceen_US
uk.faculty-abbr.csPřFcs_CZ
uk.degree-discipline.csKlinická a toxikologická analýzacs_CZ
uk.degree-discipline.enClinical and Toxicological Analysisen_US
uk.degree-program.csKlinická a toxikologická analýzacs_CZ
uk.degree-program.enClinical and Toxicological Analysisen_US
thesis.grade.csVýborněcs_CZ
thesis.grade.enExcellenten_US
uk.abstract.csVedle rekombinantní exprese proteinů v prokaryotických buněčných liniích (E. coli) se dostávají do popředí systémy, které rychle, spolehlivě a stabilně produkují rekombinantní proteiny v lidských buněčných liniích. Ty zaručují vhodnou terciární strukturu a posttranslační modifikace požadovaných produktů. Jednou z možností, jak docílit produkce rekombinantních proteinů v lidských buněčných liniích, je použití lentivirových vektorů. Tato práce popisuje přípravu lentivirového vektoru (plazmidu) Daedalus, který obsahuje konstrukt pro rekombinantní expresi sekretované alkalické fosfatázy. K přípravě požadovaného plazmidu byly použity metody založené na inzerci genu sekretované alkalické fosfatázy pomocí restrikčních endonukleáz a metody, založené na amplifikaci polymerázovou řetězovou reakcí, klonování bez restrikčního štěpení, přenosová polymerázová reakce a Gibsnova reakce.cs_CZ
uk.abstract.enBesides recombinant protein expression in prokaryotic cell lines (E. coli), systems, that could quickly, reliably and stably produce recombinant proteins in human cell lines, come to the fore. These cell lines assure proper tertiary structure and post-translational modification of the desired products. One of the ways to achieve production of recombinant proteins in human cell lines is the use of lentiviral vectors. This thesis describes the preparation of the lentiviral vector (plasmid) Daedalus, which contains a construct for recombinant expression of secreted alkaline phosphatase. For the preparation of the desired plasmid methods based on insertion of the secreted alkaline phosphatase gene using the restriction endonucleases and methods based on amplification by polymerase chain reaction (restriction-free cloning, transfer polymerase chain reaction and Gibson assembly) were used.en_US
uk.file-availabilityV
uk.publication.placePrahacs_CZ
uk.grantorUniverzita Karlova, Přírodovědecká fakulta, Katedra biochemiecs_CZ


Files in this item

Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail

This item appears in the following Collection(s)

Show simple item record


© 2017 Univerzita Karlova, Ústřední knihovna, Ovocný trh 560/5, 116 36 Praha 1; email: admin-repozitar [at] cuni.cz

Za dodržení všech ustanovení autorského zákona jsou zodpovědné jednotlivé složky Univerzity Karlovy. / Each constituent part of Charles University is responsible for adherence to all provisions of the copyright law.

Upozornění / Notice: Získané informace nemohou být použity k výdělečným účelům nebo vydávány za studijní, vědeckou nebo jinou tvůrčí činnost jiné osoby než autora. / Any retrieved information shall not be used for any commercial purposes or claimed as results of studying, scientific or any other creative activities of any person other than the author.

DSpace software copyright © 2002-2015  DuraSpace
Theme by 
@mire NV