Porovnání HPLC-UV a HPLC-MS/MS metod v analýze vybraných 1,4-benzodiazepinů

Abstract

Cílem této práce byla optimalizace separačních podmínek vysokoúčinné kapalinové chromatografie pro separaci oxazepamu a lorazepamu. Dále byla porovnána detekce s diodovým polem a hmotnostním spektrometrem. Pro hmotnostní spektrometr byly použity dva druhy iontových zdrojů - klasického elektrosprej a elektrosprej s přídavným tryskovým proudem. Optimálních separačních podmínek bylo dosaženo použitím mobilní fáze obsahující acetonitril/0,1% octovou kyselinu (30/70) (v/v) a separační kolony Kinetex C8 100A (75 x 2,1 mm, 2,6 μm). Za těchto separačních podmínek došlo k rozdělení studovaných analytů na základní linii a celková doba analýzy nepřesáhla tři minuty. Ze studovaných detekcí bylo dosaženo nejnižších hodnot limitu detekce (LOD) a limitu stanovitelnosti (LOQ) pomocí ionizace elektrosprejem s přídavným tryskovým proudem. Pro tento typ ionizace se limity detekce pohybovaly od 17 µg ml−1 do 32 µg ml−1 .

This work was focused on the optimization of separation of oxazepam and lorazepam in high performance liquid chromatography. Diode array detection and mass spectrometric detection using electrospray ionization and electrospray ionization with Jet Stream technology were optimized and compared. The optimal chromatographic system consisted of a Kinetex C8 100A (75 x 2.1 mm, 2.6 μm) and binary mobile phase of acetonitrile/0.1% formic acid (30/70) (v/v). Under the optimized separation conditions both studied compounds were baseline resolved and eluted within 3 min. Electrospray ionization with Jet Stream technology provided the lowest values of the limit of detection (LOD) and limit of quantification (LOQ). Limits of detection were ranging from 17 to 32 µg mL−1 .