Stanovení derivátů estrogenu metodou sekvenční injekční chromatografie

Abstract

Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Mgr. Lucie Kosařová Konzultant: PharmDr. Petr Chocholouš, Ph.D. Název rigorózní práce: Stanovení derivátů estrogenu metodou sekvenční injekční chromatografie Tato práce představuje první využití sekvenční injekční chromatografie s použitím monolitické kolony Merck® Chromolith® Performance RP-18e 100 mm × 3 mm s předkolonou Merck® Chromolith® RP-18e 5 mm × 3 mm o celkové délce 105 mm pro testování čtyř derivátů estrogenu blízkých svou strukturou a vnitřního standardu (etylparaben). K analýze byl použit komerčně dostupný systém SIChromTM (FIAlab® Instruments Inc., USA), mobilní fáze acetonitril:voda 40:60 (v/v) a CCD UV-VIS detektor se spektrofotometrickou detekcí při 225 nm. Pro jednu analýzu, která trvala 7,5 min, bylo použito 10 µl vzorku a 3 ml mobilní fáze. Bylo využito izokratické eluce a průtoková rychlost byla nastavena na 8 μl.s-1 . Chromatografické píky všech látek vykazovaly dobrou symetrii a rozdělení. Za výše uvedených podmínek bylo dosaženo vysoké účinnosti separace, což ukazuje další možné využití sekvenční injekční chromatografie v analytické chemii. Klíčová slova: sekvenční injekční chromatografie, monolitické kolony, estrogeny

Charles University in Prague Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical chemistry Candidate: Mgr. Lucie Kosařová Consultant: PharmDr. Petr Chocholouš, Ph.D. Title of Thesis: Determination of estrogen derivatives by sequential injection chromatography This work presents the first utilization of sequential injection chromatography for determination of four estrogen derivatives with similar structure and an internal standard (ethylparaben) with the use of monolithic column Merck® Chromolith® Performance RP-18e 100 mm × 3 mm and pre-column Merck® Chromolith® RP-18e 5 mm × 3 mm of total length 105 mm. A commercially available SIC system - SIChromTM (FIAlab® Instruments Inc., USA), mobile phase composed of acetonitrile:water 40:60 (v/v) and CCD UV-VIS detector were used. Spectrophotometric detection was set up at wavelength of 225 nm. The injected volume of sample solutions was 10 µl and 3 ml of mobile phase was pumped isocratic at flow rate 8 μl.s-1 . High separation efficiency, good peak symmetry and resolution were obtained at these conditions, showing another possibility of use sequential injection chromatography in analytical chemistry. Keywords: sequention injection chromatography, monolithic columns, estrogens