Využití systému přepínání kolon v HPLC pro stanovení vybraných mykotoxinů ve vzorcích piva na českém trhu

Abstract

Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Ivona Lhotská Školitel, konzultant: María Carolina Fernández Ramos, Ph.D, Doc. RNDr. Dalibor Šatínský, Ph.D. Název diplomové práce: Využití systému přepínání kolon v HPLC pro stanovení vybraných mykotoxinů ve vzorcích piva na českém trhu Byla vytvořena nová, rychlá a citlivá metoda vysokoúčinné kapalinové chromatografie pro současné stanovení mykotoxinů ochratoxinu A a citrininu v pivu za použití přepínání kolon pro on-line úpravu vzorku. 100 µl piva bylo přímo dávkováno do systému. Izolace analytů z matrice piva proběhla na předkoloně Ascentis Express RP-C18 (5 x 4,6 mm, 2,7 µm) promýváním methanolem - 0,5% vodným roztokem kyseliny octové (30:70, v/v) o průtoku 2 ml/min po dobu 2 minut. Po přepnutí ventilu byly látky dále separované na chromatografické koloně Ascentis Express Phenyl-Hexyl (100 x 4,6 mm, 2,7 µm) mobilní fází o průtoku 1 ml/min ve složení acetonitril - 0,5% vodný roztok kyseliny octové (45:55, v/v). V čase 3 - 5,5 minuty lineárně narůstá gradient na 75:25. Chromatografická kolona byla temperována na 50řC. Fluorimetrická detekce byla nastavena na vlnové délky Ex 335 nm, Em 497 nm. Analýza jednoho vzorku včetně on-line úpravy trvá 6 minut. Limit kvantifikace této metody je 0,01 µg/l...

Charles University in Prague Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical Chemistry Candidate: Ivona Lhotská Supervisor, consultant: María Carolina Fernández Ramos, Ph.D, Doc. RNDr. Dalibor Šatínský, Ph.D. Title of Diploma Thesis: Column switching chromatography for mycotoxines determination in Czech beer samples A new fast and sensitive method of high performance liquid chromatography for simultaneous determination of mycotoxins ochratoxin A and citrinin using column- switching system for on-line sample pretreatment was developed. 100 µl of beer was injected directly into the chromatographic system. Isolation of analytes was performed on guard column Ascentis Express RP-C18 (5 x 4.6 mm, 2.7 µm) washing out with methanol - water solution of acetic acid 0.5% (30:70, v/v), at a flow rate 2 ml/min; time of valve switch was set on 2 minutes. The separation was performed on Ascentis Express Phenyl-Hexyl column (100 x 4.6 mm, 2.7 µm) with mobile phase of composition acetonitril - water solution of acetic acid 0.5% at a flow rate 1 ml/min. A gradient was increasing up to 75:25 linearly in time 3 - 5.5 min. The temperature 50řC was set up for column separation. Wavelengths of fluorimetric detection were set at Ex 335 nm, Em 497 nm. Analysis of one sample including on-line pretreatment was...