Validace metody stanovení amiodaronu a jeho metabolitu pomocí HPLC

Abstract

Tato diplomová práce se zabývá zavedením kvantitativního stanovení amiodaronu a jeho metabolitu desethylamiodaronu pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie s UV detekcí s využitím vnitřního standardu dronedaronu a ověřením jejího použití při analýze vzorků pacientů. V teoretické části je řešena problematika amiodaronu a kapalinové chromatografie a možnosti stanovení této látky různými metodami. V experimentální části je popsán postup analýzy amiodaronu a desethylamiodaronu pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie a validace této metody, zahrnující parametry LOD, LOQ, linearitu, pracovní rozsah, preciznost a výtěžnost (recovery). Závěrem práce jsou srovnány dva způsoby hodnocení výsledků analýzy na souboru 41 pacientů. Validačními parametry byla ověřena spolehlivost analytického postupu.

This thesis introduces a method of quantitative determination of amiodarone and its metabolite desethylamiodarone by high performance liquid chromatography with UV detection using internal standard dronedarone and verification of its use in the analysis of patient samples. The theoretical part describes method of liquid chromatography, amiodarone substance and possibilities of its determination using selected methods. The experimental part of the thesis describes procedures for analysis of amiodarone and desethylamiodarone utilizing high performance liquid chromatography and also includes validation of such method, including the following parameters: LOD, LOQ, linearity, working range, precision and recovery. In the conclusion part, the thesis compares two methods of result evaluation, which were gained from a sample of 41 patients. Reliability of such analytical procedure was verified through validation parameters.