Show simple item record

Production of mouse NK cell receptor NKR-P1C and seeking of tis ligand
dc.contributor.advisorVaněk, Ondřej
dc.creatorPucholtová, Helena
dc.date.accessioned2017-05-26T16:31:10Z
dc.date.available2017-05-26T16:31:10Z
dc.date.issued2014
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/20.500.11956/64122
dc.description.abstractPřirození zabíječi neboli NK buňky jsou buňky imunitního systému, zprostředkovávající vrozenou imunitu proti patogenům a nádorům, aniž by musely být předem vystaveny antigenu. Zastávají tak okamžitou protivirovou obranu již během počáteční fáze, tedy před zahájením tvorby protilátek a před vývojem specifických cytotoxických T-lymfocytů. Na svém povrchu mají NK buňky širokou škálu inhibičních a aktivačních receptorů, jejichž významnou rodinou jsou receptory podobné lektinům C - typu, z nichž byla první objevena právě rodina NKR-P1 ("natural killer cell receptor - protein 1"). Tato práce se zabývá přípravou/studiem myšího NK buněčného aktivačního receptoru NKR-P1C a hledáním jeho vazebného partnera. Rozpustná forma proteinu NKR-P1C byla připravena rekombinantní expresí pomocí tranzientní transfekce buněčné linie HEK293 (human embryonic kidney 293) s divokou, či jednoduchou glykosylací jako IgG-Fc fúzní protein, z nějž bylo možné po afinitní purifikaci, štěpení TEV proteasou a následnou HPLC chromatografií získat čistý dimer NKR-P1C. Dimernní forma proteinu byla následně využita na strukturní studium pomocí krystalizačních pokusů. Na fúzní protein byl navázán protein A značený fluorescenční sondou DyLight 488. Tímto komplexem byly značeny myší tkáně a buněčné linie za účelem hledání ligandu.cs_CZ
dc.description.abstractNatural killer or NK cells are immunocytes that mediate innate immunity against pathogens and tumors without pre-exposition to the antigen. They are holding rapid antiviral defense during the initial phase of immune response, before starting the production of antibodies and the development of specific cytotoxic T -lymphocytes. On the surface of NK cells is expressed wide range of inhibition and activation receptors. Important family of those receptors are C - type lectin like from which the family of NKR - P1 ("natural killer cell receptor - protein 1") was discovered first. Diploma thesis deals with the preparation/study of mice NK cell activation receptor NKR- P1C and searching for its binding partner. The soluble form of the protein NKR-P1C was prepared by recombinant expression using the transient transfection of HEK293 cell line (human embryonic kidney 293) with wild type or homogenous glycosylation as IgG - Fc fusion protein, from which was it possible to obtain pure dimer of NKR P1C, after process of affinity purification, TEV protease cleavage and HPLC chromatography. The fusion protein was bound to protein A labeled with a fluorescent probe DyLight 488. Mice tissues and cell lines were labeled by this complex for purpose of seeking ligand.en_US
dc.languageČeštinacs_CZ
dc.language.isocs_CZ
dc.publisherUniverzita Karlova, Přírodovědecká fakultacs_CZ
dc.subjectNKR-P1Ccs_CZ
dc.subjectreceptorcs_CZ
dc.subjectHEK293cs_CZ
dc.subjectproteinová krystalografiecs_CZ
dc.subjectrekombinantní exprese,protein Acs_CZ
dc.subjectligandcs_CZ
dc.subjectNKR-P1Cen_US
dc.subjectreceptoren_US
dc.subjectHEK293en_US
dc.subjectprotein crystallographyen_US
dc.subjectrecombinant expression,protein Aen_US
dc.subjectliganden_US
dc.titleProdukce myšího NK buněčného receptoru NKR-P1C a hledání jeho liganducs_CZ
dc.typediplomová prácecs_CZ
dcterms.created2014
dcterms.dateAccepted2014-06-02
dc.description.departmentDepartment of Biochemistryen_US
dc.description.departmentKatedra biochemiecs_CZ
dc.description.facultyPřírodovědecká fakultacs_CZ
dc.description.facultyFaculty of Scienceen_US
dc.identifier.repId130130
dc.title.translatedProduction of mouse NK cell receptor NKR-P1C and seeking of tis liganden_US
dc.contributor.refereeČerná, Věra
dc.identifier.aleph001782077
thesis.degree.nameMgr.
thesis.degree.levelnavazující magisterskécs_CZ
thesis.degree.disciplineKlinická a toxikologická analýzacs_CZ
thesis.degree.disciplineClinical and Toxicological Analysisen_US
thesis.degree.programKlinická a toxikologická analýzacs_CZ
thesis.degree.programClinical and Toxicological Analysisen_US
uk.thesis.typediplomová prácecs_CZ
uk.taxonomy.organization-csPřírodovědecká fakulta::Katedra biochemiecs_CZ
uk.taxonomy.organization-enFaculty of Science::Department of Biochemistryen_US
uk.faculty-name.csPřírodovědecká fakultacs_CZ
uk.faculty-name.enFaculty of Scienceen_US
uk.faculty-abbr.csPřFcs_CZ
uk.degree-discipline.csKlinická a toxikologická analýzacs_CZ
uk.degree-discipline.enClinical and Toxicological Analysisen_US
uk.degree-program.csKlinická a toxikologická analýzacs_CZ
uk.degree-program.enClinical and Toxicological Analysisen_US
thesis.grade.csVýborněcs_CZ
thesis.grade.enExcellenten_US
uk.abstract.csPřirození zabíječi neboli NK buňky jsou buňky imunitního systému, zprostředkovávající vrozenou imunitu proti patogenům a nádorům, aniž by musely být předem vystaveny antigenu. Zastávají tak okamžitou protivirovou obranu již během počáteční fáze, tedy před zahájením tvorby protilátek a před vývojem specifických cytotoxických T-lymfocytů. Na svém povrchu mají NK buňky širokou škálu inhibičních a aktivačních receptorů, jejichž významnou rodinou jsou receptory podobné lektinům C - typu, z nichž byla první objevena právě rodina NKR-P1 ("natural killer cell receptor - protein 1"). Tato práce se zabývá přípravou/studiem myšího NK buněčného aktivačního receptoru NKR-P1C a hledáním jeho vazebného partnera. Rozpustná forma proteinu NKR-P1C byla připravena rekombinantní expresí pomocí tranzientní transfekce buněčné linie HEK293 (human embryonic kidney 293) s divokou, či jednoduchou glykosylací jako IgG-Fc fúzní protein, z nějž bylo možné po afinitní purifikaci, štěpení TEV proteasou a následnou HPLC chromatografií získat čistý dimer NKR-P1C. Dimernní forma proteinu byla následně využita na strukturní studium pomocí krystalizačních pokusů. Na fúzní protein byl navázán protein A značený fluorescenční sondou DyLight 488. Tímto komplexem byly značeny myší tkáně a buněčné linie za účelem hledání ligandu.cs_CZ
uk.abstract.enNatural killer or NK cells are immunocytes that mediate innate immunity against pathogens and tumors without pre-exposition to the antigen. They are holding rapid antiviral defense during the initial phase of immune response, before starting the production of antibodies and the development of specific cytotoxic T -lymphocytes. On the surface of NK cells is expressed wide range of inhibition and activation receptors. Important family of those receptors are C - type lectin like from which the family of NKR - P1 ("natural killer cell receptor - protein 1") was discovered first. Diploma thesis deals with the preparation/study of mice NK cell activation receptor NKR- P1C and searching for its binding partner. The soluble form of the protein NKR-P1C was prepared by recombinant expression using the transient transfection of HEK293 cell line (human embryonic kidney 293) with wild type or homogenous glycosylation as IgG - Fc fusion protein, from which was it possible to obtain pure dimer of NKR P1C, after process of affinity purification, TEV protease cleavage and HPLC chromatography. The fusion protein was bound to protein A labeled with a fluorescent probe DyLight 488. Mice tissues and cell lines were labeled by this complex for purpose of seeking ligand.en_US
uk.file-availabilityV
uk.publication.placePrahacs_CZ
uk.grantorUniverzita Karlova, Přírodovědecká fakulta, Katedra biochemiecs_CZ


Files in this item

Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail

This item appears in the following Collection(s)

Show simple item record


© 2017 Univerzita Karlova, Ústřední knihovna, Ovocný trh 560/5, 116 36 Praha 1; email: admin-repozitar [at] cuni.cz

Za dodržení všech ustanovení autorského zákona jsou zodpovědné jednotlivé složky Univerzity Karlovy. / Each constituent part of Charles University is responsible for adherence to all provisions of the copyright law.

Upozornění / Notice: Získané informace nemohou být použity k výdělečným účelům nebo vydávány za studijní, vědeckou nebo jinou tvůrčí činnost jiné osoby než autora. / Any retrieved information shall not be used for any commercial purposes or claimed as results of studying, scientific or any other creative activities of any person other than the author.

DSpace software copyright © 2002-2015  DuraSpace
Theme by 
@mire NV